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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3713
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-08
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3713 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人病毒8型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Human Herpesvirus-8(HHV-8)8 | LZR3713 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
皺紋假單胞菌Monkey MIgD (Membrane IgD) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas corrugata
香菇屬（大斗菇）Monkey BALP (Bone Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula sp.
釀酒酵母Monkey GAD1 (Glutamate Decarboxylase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
細(xì)鏈格孢Monkey NUP188 (Nucleoporin 188kDa) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)Monkey FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus cereus
沙福芽孢桿菌Monkey GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus safensis
頭狀葡萄球菌Monkey PCDHβ2 (Protocadherin Beta 2) ELISA Kit 用途: 昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)污染防治研究
土生類諾卡氏菌Monkey OIT3 (Oncoprotein Induced Transcript 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Nocardioides terrigena
草花忍冬葉點(diǎn)霉Monkey SPC (Pulmonary Surfactant Associated Protein C) ELISA Kit 用途: 代謝產(chǎn)物
氨菌素鏈霉菌Monkey AGC (Aggrecan) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces alanosinicus
大腸埃希氏菌Monkey HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
釀酒酵母Monkey LAP (Leucine Aminopeptidase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
土曲霉Monkey TNNT1 (Troponin T Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit用途: 降解纖維素類物質(zhì)(degrades cellulosic materials)
長(zhǎng)枝木霉Monkey NKA (Neurokinins A) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum
凍土毛霉Monkey HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor hiemalis
人病毒8型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 CCDC39 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體去氧地膽草素2-Propenoic acid,2-methyl-,(3aR,4S,9R,11E,12aR)-2,3,3a,4,5,9,10,12a-octahydro-11-methyl-3-methylene-2,7-dioxo-7H-9,6-methenofuro[2,3-f]oxacycloundecin-4-ylester對(duì)照藥材 分 子 式: C19H20O6 分 子 量: 344.3585
CCDC30 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體3-氧代甘遂-7,24-二烯-21-酸Lanosta-7,24-dien-21-oic acid, 3-oxo-, (13alpha,14beta,17alpha,20S)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H46O3 分 子 量: 454.68444
CCDC34 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白34抗體長(zhǎng)春氟寧Vinflunine中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C45H54F2N4O8 分 子 量: 816.93
CCDC75 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白75抗體山梨醇溶液(1.1mol/L,無(wú)菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CCDC65 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白65抗體溴化乙錠清除液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Signal recognition particle 信號(hào)識(shí)別顆?？贵w壯觀/奇霉素溶液(Spectinomycin,50mg/ml)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
CCDC157 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白157抗體Schiff試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
