![]() |
- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3660
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3660 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
阿古尼嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Haemophilus agni | LZR3660 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
弗氏鏈霉菌Monkey CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces fradiae
天花板節(jié)桿菌Monkey CLDN9 (Claudin 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter tecti
亞黑管孔菌Monkey NOS2/iNOS (Nitric Oxide Synthase 2, Inducible) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Monkey PRF1 (Perforin 1/Pore-Forming Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母Monkey LATS (Long Acting Thyroid Stimulator) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
美澳型核果褐腐病菌Monkey FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Monilinia fructicola
產(chǎn)皮歐(票)霉素鏈霉菌Monkey ACP3/PAP (Prostatic Acid Phosphatase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces piomogenes
奧氏蜜環(huán)菌Monkey PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母Monkey Neopterin ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
石泉海源菌Monkey sFMC (Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Idiomarina fontislapidosi
猴假單胞菌Monkey FAS/CD95/TNFRSF6 (Factor Related Apoptosis) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas simiae
鹽漬喜鹽芽孢桿菌Monkey LDHC (Lactate Dehydrogenase C) ELISA Kit 拉丁屬名: Halobacillus salinus
聚團屈撓桿菌Monkey MYC (V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Flexibacter tractuosus
菊池鏈格孢Monkey NAIP (Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
弗雷德里克斯堡假單胞菌Monkey AP62A (Anti-P62 Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
阿古尼嗜血桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體Sorensen磷酸緩沖液(1×,pH6.2)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
EIF2C1/Ago1 真核翻譯起始因子2C1抗體乙酸鈉溶液(3mol/L,pH6.0,無菌)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Anillin 胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液(pH=4.00)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
BIN3 細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體丁香亭-3-O-葡糖苷4H-1-Benzopyran-4-one,3-(b-D-glucopyranosyloxy)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H24O13 分 子 量: 508.42886
CCDC11 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體雌三醇 3-葡萄糖醛酸苷b-D-Glucopyranosiduronic acid, (16a,17b)-16,17-dihydroxyestra-1,3,5(10)-trien-3-yl化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H32O9 分 子 量:
CDC3/CDC10/Septin 7 細(xì)胞周期調(diào)控因子3抗體三甲基氯化錫Trimethyltin chloride化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C3H9ClSn 分 子 量: 199.27
CEP55 中心體蛋白55kDa抗體胰蛋白酶溶液(0.1%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量: