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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3669
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-13
- 更新日期: 2025-02-08
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3669 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
嗜血桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | Haemophilus spp. | LZR3669 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
扣囊復(fù)膜孢酵母Monkey LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
宇佐美曲霉Monkey ENA-78 (Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus usamii
黑曲霉Monkey c-jun ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
枯草芽胞桿菌Monkey Fcγ (Fc Fragment of IgG) ELISA Kit 拉丁屬名: subtilis
盔狀畢赤酵母Monkey ATF-2 (Activating Transcription Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia galeiformis
大腸埃希菌Monkey NOS3/eNOS (Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial) ELISA Kit拉丁屬名: coli
嗜冷生孢八疊球菌Monkey MAG (Myelin Associated Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Sporosarcina psychrophila
發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)(現(xiàn)1)Monkey NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate) ELISA Kit 拉丁屬名: Agrobacterium rhizogenes(Riker et al.)Conn
灰毛青霉Monkey Ras-GAP1 (Rac-GTPase Activating Protein 1) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
褐黃木耳(琥珀木耳)Monkey EPYC (Epiphycan) ELISA Kit拉丁屬名: Auricularia fuscosuccinea
Paenibacillus thailandensisMonkey TS/TYMS (Thymidylate Synthetase) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus thailandensis
柄籃狀菌Monkey ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Talaromyces stipitatus
巨大芽孢桿菌Monkey ARRβ1 (Arrestin Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus megaterium
解淀粉芽孢桿菌Monkey IL-17 (Interleukin 17) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens
雞油菌Monkey IGFBP-5 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
嗜血桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒 DPEP3 膜二肽酶3抗體人參環(huán)氧炔醇1-Octene-4,6-diyn-3-ol,8-[(2R,3S)-3-heptyl-2-oxiranyl]-, (3R)-化學(xué)標準品 分 子 式: C17H24O2 分 子 量:
DSN1 著絲粒相關(guān)蛋白DSN1抗體羅漢果皂苷ⅡA2b-D-Glucopyranoside, (3b,9b,10a,11a,24R)-11,24,25-trihydroxy-9-methyl-19-norlanost-5-en-3-yl6-O-b-D-glucopyranosyl- (9CI)中藥標準品 分 子 式: C42H72O14 分 子 量: 801.01268
DUSP13 雙特異性磷酸酶13抗體胡黃連苷II6-Vanilloylcatalpol中藥標準品 分 子 式: C23H28O13 分 子 量: 512.46062
Flotillin 1 脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體苦蒿素2(5H)-Furanone,4-[2-[(1S,2R,4aS,7S,8aR)-4a-[(acetyloxy)methyl]-1,2,3,4,4a,7,8,8a-octahydro-7-hydroxy-5-(hydroxymethyl)-1,2-dimethyl-1-naphthalenyl]ethyl]-中藥標準品 分 子 式: C22H32O6 分 子 量:
GAJ/MND1 減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體蘇式-1-C-丁香酚基丙三醇1,2,3-Propanetriol,1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-, (1R,2R)-rel-對照藥材 分 子 式: C11H16O6 分 子 量: 244.24114
GLP2R 胰素樣肽2受體抗體半枝蓮堿Scutebarbatine A中藥標準品 分 子 式: C32H34N2O7 分 子 量: 558.6
AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體血竭素高氯酸鹽DRACORHODIN PEROCHLORATE中藥標準品 分 子 式: C17H15O3+.CH4 分 子 量: 283.34166