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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3745
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3745 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞喉病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV) | LZR3745 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
青貯窖芽孢桿菌Monkey CYP1B1 (Cytochrome P450 1B1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus siralis
枯草芽孢桿菌Monkey NRP1 (Neuropilin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Monkey SPTβN4 (Spectrin Beta, Non Erythrocytic 4) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌Monkey VEGF-D (Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Monkey Pro-MMP-13 (Pro-Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
頂青霉Monkey BMP-15 (Bone Morphogenetic Protein 15) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium corylophilum
扣囊復(fù)膜孢酵母Monkey NES1 (Nesfatin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
黑紫紅菇Monkey IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粘著劍菌Monkey FPA (Fibrinopeptide A) ELISA Kit用途: 植物冠癭病害，遺傳轉(zhuǎn)化材料
喇叭菌Monkey CBX3 (Chromobox Homolog 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豆芽菌1-2Monkey TAB (Thyroxine Antibody) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌Monkey PDIA3 (Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
球孢白僵菌Monkey F13A1 (Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide) ELISA Kit 用途: 生物防治
極單胞菌屬Monkey MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Polaromonas glacialis
枯斑擬盤多毛孢Monkey PGD2-MOX (Prostaglandin D2-Methoxime) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
雞喉病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 ANKRD54 錨蛋白重復(fù)域54抗體異香蘭酸3-Hydroxy-4-methoxybenzoic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C8H8O4 分 子 量: 168.14672
COX4NB COX4NB蛋白抗體人參皂苷Rk2Ginsenoside RK1化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C42H70O12 分 子 量: 766.998
FAM82A1 微管動力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranosideOlean-12-en-28-oic acid,3-[[O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1?2)-O-[b-D-glucopyranosyl-(1?4)]-a-L-arabinopyranosyl]oxy]-23-hydroxy-, (3b,4a)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H48O2 分 子 量: 440.70092
FAM46D/CT112 /睪丸抗原112抗體甲基麥冬黃烷酮BMethylophiopogonanone B中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H20O5 分 子 量: 328.3591
FAM50B FAM50B蛋白抗體松柏酸Pinusolidic acid對照藥材 分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43392
FAM50C FAM50C蛋白抗體芹菜素-7-0-（2G-鼠李糖）龍膽糖苷Apigenin 7-O-(2G-rhamnosyl)gentiobioside中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C33H40O19 分 子 量: 740.66
HDHD1 HDHD1蛋白抗體克羅酰胺3-Benzofurancarboxamide, 2,3-dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-N-(2-(4-hydroxyphenyl)ethyl)-5-((1E)-3-((2-(4-hydroxyphenyl)ethyl)amino)-3-oxo-1-propenyl)-7-methoxy-, (2R,3R)-rel-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C36H36N2O8 分 子 量: 624.67964
