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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

賴氨酸芽胞桿菌屬Monkey CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sp.

擬盤多毛孢Monkey CD23/FcεRII (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit用途: 腐生菌

根霉屬Monkey PCP (Procollagen C Peptidase)ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus  sp.

球孢白僵菌Monkey HIF-1α (Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana

地衣芽孢桿菌Monkey TSP1 (Thrombin Sensitive Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  licheniformis

毛韌革菌Monkey NRG-3 (Neuregulin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Stereum hirsutum

微球菌Monkey MYOG (Myogenin) ELISA Kit拉丁屬名: Micrococcus sp.

產(chǎn)氣莢膜梭菌       毒素C型Monkey GTF2B (General Transcription Factor IIB) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens       Type C

根瘤菌Monkey C4BPβ (C4 Binding Protein Beta) ELISA Kit 用途: 固氮

耐鹽四聯(lián)球菌Monkey GCSFR (Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit拉丁屬名: Tetragenococcus  halophilus

紫薇布勒酵母Monkey MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Bullera lagerstroemiae

香菇Monkey GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

枯草芽胞桿菌枯草亞種Monkey OC/BGP (Osteocalcin/Bone Gla Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis

極細枝孢Monkey GIF (Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium tenuissimum

嗜中溫寒冷桿菌Monkey mTOR (Mammalian Target of Rapamycin) ELISA Kit拉丁屬名: Frigoribacterium mesophilum
轉(zhuǎn)輪蟹通用探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格FCHSD1  FCHSD1蛋白抗體戈米辛JGomisin J中藥標準品  分 子 式: C22H28O6 分 子 量: 388.4541

FOP/FGFR1OP  FGFR1癌基因伴侶蛋白抗體異性南五味子丙素; 異南五味子素 C2-Butenoic acid,2-methyl-,(6R,7R,8R,13S)-5,6,7,8-tetrahydro-1,2,3,13-tetramethoxy-6,7-dimethylbenzo[3,4]cycloocta[1,2-f][1,3]benzodioxol-8-ylester, (2E)-化學(xué)標準品 分 子 式: C28H34O8 分 子 量:

FGFR1OP2  FGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體增強型抗熒光淬滅封片劑標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

SUMO-1/UBC9  泛素蛋白連接酶E2I抗體升麻素苷Cimicifugoside化學(xué)標準品 分 子 式: C37H54O11 分 子 量: 674.82

UBE2D2  泛素蛋白連接酶D2抗體表兒茶素沒食子酸酯(-)-Epicatechin gallate中藥標準品  分 子 式: C22H18O10 分 子 量: 442.38

Ube2G2/UBC7  泛素蛋白連接酶G2抗體丁香油Clove oil其它化學(xué)試劑 分 子 式: W99 分 子 量:

Ube2L3  泛素蛋白連接酶L3抗體O-乙酰五味子酯LAc-Schizantherin L化學(xué)標準品 分 子 式: C29H32O10 分 子 量: 540.558