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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3746
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3746 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
脾腎壞死病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Infectious Spleen and Kidney Necrosis Virus(ISKNV ) | LZR3746 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
香栓孔菌Monkey FSCN (Fascin) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes suaveolens
耐鹽考克氏菌Monkey COL10 (Collagen Type X) ELISA Kit 拉丁屬名: Kocuria halotolerans
地下鹽單胞菌Monkey MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas subterranea
蘇云金芽孢桿菌Monkey DEFα1 (Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit用途: 害蟲生物防治
殼菌Monkey TP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
變粉紅鎖擲孢酵母Monkey TDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁屬名: Sporidiobolus metaroseus
污黑腐皮殼Monkey GSTα1 (Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
類干酪乳桿菌Monkey PCIII (Procollagen III) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus paracasei
金黃色葡萄球菌Monkey LRP6 (Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus
紅色雷夫松氏菌Monkey NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Leifsonia rubra
水生拉恩氏菌Monkey ACVA (Activin A) ELISA Kit拉丁屬名: Rahnella aquatilis
博韋環(huán)紋炭團(tuán)菌Monkey SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 拉丁屬名: Annulohypoxylon bovei
釀酒酵母Monkey C8b (Complement Component 8b) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希氏桿菌Monkey GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
中國(guó)木霉Monkey LFA-2/CD2 (Lymphocyte Function Associated Antigen 2) ELISA Kit拉丁屬名: T.sinensis
脾腎壞死病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格HDHD2/IER3IP1 HDHD2蛋白抗體康普瑞汀A-1(Z)-3-Methoxy-6-(3,4,5-trimethoxystyryl)benzene-1,2-diol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H20O6 分 子 量: 332.3478
HDHD3 HDHD3蛋白抗體前杯莧甾酮Stigmast-7-en-26-oicacid, 2,3,14,20,22,28-hexahydroxy-6-oxo-, d-lactone, (2b,3b,5b,22R,24S,25S,28R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C29H44O8 分 子 量:
HDHD2B/LHPP HDHD2B蛋白抗體辛弗林鹽酸鹽4-(1-Hydroxy-2-(methylamino)ethyl)phenol hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C9H13NO2.HCl 分 子 量: 203.66596
HEATR3 HEATR3蛋白抗體13-羥基氧化小檗堿13-Hydroxyoxyberberine化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
HEATR6 增強(qiáng)蛋白抗體醋酸辛酯Octyl acetate中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H20O2 分 子 量: 172.27
Proteasome 19S S5A 26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型S*抗體磺胺乙酰鈉Sulfacetamide sodium化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C8H9N2NaO3S 分 子 量: 236.22
Headpin/SERPINB13 絲氨酸蛋白酶抑制劑13抗體球松素5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenylchroman-4-one對(duì)照藥材 分 子 式: C16H14O4 分 子 量: 270.27996
