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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3767
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3767 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
碩大利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Leishmania major | LZR3767 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
地霉半乳糖酵母Monkey PLCγ2 (Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Galactomyces geotrichum
德氏乳桿菌保加利亞亞種Monkey FAIM3 (Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
明尼蘇達(dá)被毛孢Monkey EGR3 (Early Growth Response Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Hirsula minnesotensis
Novosphingobium panipatenseMonkey IL-16 (Interleukin 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Novosphingobium panipatense
雜色曲霉Monkey IgG3 (Immunoglobulin G3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母Monkey NUP35 (Nucleoporin 35kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
中國毛霉Monkey PLCβ1/PI-PLC (Phospholipase C Beta 1, Phosphoinositide Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor sinensis
大腸埃希氏菌Monkey MSR1 (Macrophage Scavenger Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
微黃八疊球菌Monkey SOX1 (Sex Determining Region Y Box Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Sarcina sp.
韓國生孢八疊球菌Monkey ELMO2 (Engulfment And Cell Motility 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Sporosarcina koreensis
貪噬菌屬Monkey FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁屬名: Variovorax ginsengisoli
紅球菌Monkey CK-LMW (Cytokeratin Low Molecular Weight) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus sp.
季也蒙畢赤酵母Monkey PYGL (Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia guilliermondii
棲泥鹽鹽八疊球菌Monkey PRB (Retinoblastoma Tumor Suppressor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Halosarcina limi
布氏假單胞菌Monkey GPC4 (Glypican 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas brenneri
碩大利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FKSG14/Centromere protein K 著絲粒蛋白K牡荊內(nèi)酯Vitexilactone中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C22H34O5 分 子 量: 378.50236
FNDC1 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1羅斯試劑(Rous Reagent)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
MX2/MXB 干擾素誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體二十三酸TRICOSANOIC ACID化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C23H46O2 分 子 量: 354.61014
APLP2 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體日蟾毒它靈中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
ZNF804A 鋅指蛋白804A抗體二氫愈創(chuàng)木脂酸Dihydroguaiaretic-acid對照藥材 分 子 式: C20H26O4 分 子 量: 330.41804
SENP5 泛素相關(guān)修飾蛋白特異性蛋白酶5抗體5-甲氧基山奈酚; 5-甲氧基莰非醇4H-1-Benzopyran-4-one, 3,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-5-methoxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12O6 分 子 量: 300.26288
APLP1 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體異阿魏酸3-(3-Hydroxy-4-methoxyphenyl)acrylic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C10H10O4 分 子 量: 194.184
