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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3779
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3779 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Loboa lobai | LZR3779 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
橙色單胞菌IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aurantimonas sp.
糞產(chǎn)堿桿菌*IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes Faecalis Caslani et Chalmers
旱生紅曲霉RETN (Resistin) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus eremophilus
空腸彎曲桿菌D2D (D-Dimer) ELISA Kit拉丁屬名: jejuni
熒光假單胞桿菌ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit用途: 無機(jī)磷細(xì)菌肥料
大腸埃希菌F1+2 (Prothrombin Fragment 1+2) ELISA Kit拉丁屬名: coli
金針菇—金白1號GSH-Px (Glutathione peroxidase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
Actinomadura amylolyticaGLP-1 (Glucagon Like Peptide 1) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura amylolytica sp/ nov/
糙皮側(cè)耳ALP (Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus ostreatus
小麥蒼白桿菌β Manase ELISA Kit拉丁屬名: Ochrobactrum tritici
栗疫菌PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit拉丁屬名: Cryphonectria parasitica
腐生葡萄球菌pIκBα (Phospho-Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus saprophyticus
豇豆慢生根瘤菌UGCG (UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮
大腸埃希氏菌PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
耶爾森氏菌FLOT2 (Flotillin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Yersinia sp.
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-CstF64(Ser498) 磷酸化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體赤式-2-(4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯氧基)-1-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-丙烷-1-醇(+)-erythro-(7R,8S)-delta8'-4,7-dihydroxy-3,3',5'-trimethoxy-8-O-4'-neolignan化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H26O6 分 子 量: 374.428
Hemoglobin Beta 血紅蛋白β抗體蠟果楊梅酸 COlean-12-en-28-oic acid,
3,27-bis[[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]oxy]-, (3b)-對照藥材 分 子 式: C48H60O10 分 子 量: 796.984
Desmuslin 中間絲蛋白β-synemin抗體7-O-甲基白楊素中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
G Protein alpha Inhibitor 1 G蛋白α抑制蛋白1抗體去氫丹參酮IIAPhenanthro[1,2-b]furan-10,11-dione,6,7-dihydro-1,6,6-trimethyl-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H16O3 分 子 量:
DSPP/Dentin phosphophoryn 牙本質(zhì)磷蛋白抗體甘草查爾酮B2-Propen-1-one,3-(3,4-dihydroxy-2-methoxyphenyl)-1-(4-hydroxyphenyl)-, (2E)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H14O5 分 子 量: 286.27936
Cathepsin S 組織蛋白酶S抗體蕎麥堿3,4-Piperidinediol,2-(hydroxymethyl)-, (2R,3R,4R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C6H13NO3 分 子 量: 147.17232
IGF2BP2/IMP2 樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體托品醇壬酸酯Nonanoic acid,8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]oct-3-yl ester, endo- (9CI)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H31NO2 分 子 量: 281.43354
