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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3787
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3787 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Madurella spp. | LZR3787 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
釀酒酵母β2-GP1 Ab IgA (β2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
貝萊斯芽胞桿菌MYD88 (Myeloid Differentiation Factor 88) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus velezensis
木賊鐮孢菌IgG2 (Immunoglobulin G2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
淺灰白鏈霉菌NRG-2 (Neuregulin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces griseoloalbus
假單胞菌屬NUP214 (Nucleoporin 214kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas prosekii
釀酒酵母FGF21(Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
玉米大斑病菌ATA (Angiotensinase A) ELISA Kit拉丁屬名: Exserohilum turcicum
薄花邊傘FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit 用途: 可食用
東方伊薩酵母MUC13 (Mucin 13) ELISA Kit拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
棲熱菌αFP (Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Thermus sp.
金龜子綠僵菌SAA3 (Serum Amyloid A3) ELISA Kit拉丁屬名: Metarhizium anisopliae
枯草芽孢桿菌TS/TYMS (Thymidylate Synthetase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
鴨肝炎病毒PIICP (Procollagen II C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Duck hepatitis virus
交鏈孢MBP/MBL (Mannose Binding Protein/Mannose Binding Lectin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
*無色桿菌GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit用途: 在無機鹽培養(yǎng)基中以20mg/L的聯(lián)苯菊酯為碳源培養(yǎng)，3天內(nèi)降解率大于45%
馬杜拉分枝菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-PRKD1(Ser738) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體黃蓮木酸Olean-18-en-28-oicacid, 3-oxo-對照藥材 分 子 式: C30H46O3 分 子 量: 454.68444
Salmonella typhimurium O 傷寒沙門氏菌體蛋白O抗原抗體8-O-乙酰山梔苷甲酯8-O-acetyl shanzhiside methyl ester中藥標準品 分 子 式: C19H28O12 分 子 量: 448.42
BASP1/Nap22 腦富含膜附著信號蛋白1抗體CelgosivirButanoic acid,(1S,6S,7S,8R,8aR)-octahydro-1,7,8-trihydroxy-6-indolizinyl ester中藥標準品 分 子 式: C12H21NO5 分 子 量: 259.29884
Salmonella enteritidis H 傷寒沙門氏菌鞭毛抗原H抗體苦豆堿Aloperine化學(xué)標準品 分 子 式: C15H24N2 分 子 量: 232.36446
phospho-PRKD1(Ser742) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體N-去甲基荷葉堿化學(xué)標準品 分 子 式: 分 子 量:
MMS19 DNA修復(fù)甲基磺酸敏感性基因19抗體氯化乙酰膽堿Acetylcholine chloride化學(xué)標準品 分 子 式: C7H16NO2.Cl 分 子 量: 181.66
HDL/high density lipoprotein 抗體胰蛋白酶溶液(0.25%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
