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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3805
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3805 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
梅克爾多元癌細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | Merkel Cell Polyomavirus(MCPyV) | LZR3805 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
球形賴氨酸芽孢桿菌CKB (Creatine Kinase, Brain) ELISA Kit拉丁屬名: Lysinibacillus sphaericus
蚜蟲莫氏黑粉菌 SIGLEC12 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 12) ELISA Kit拉丁屬名: Moesziomyces aphidis
金黃色葡萄球菌RPS6Kβ1 (Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus
納西桿菌屬GNLY (Granulysin) ELISA Kit拉丁屬名: Naxibacter
金乳牛肝菌PKC (Protein Kinase C) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
美澳型核果褐腐病菌CK-13/KRT13 (Cytokeratin 13) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
美澳型核果褐腐病菌PTD (Pentosidine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
門多薩假單胞菌CDK7 (Cyclin Dependent Kinase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas mendocina
蠟樣芽孢桿菌VE-Cadherin (Vascular Endothelial Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
熱帶假絲酵母Thyronine ELISA Kit用途: 用烷烴 飼料酵母
粉紅聚端孢霉CRLF1 (Cytokine Receptor Like Factor 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
暗褐色毛霉COL3 (Collagen Type Ⅲ) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor fuscus
枯草芽孢桿菌APP (Amyloid Precursor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
三葉草根瘤菌FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
杰丁畢赤酵母ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia jadinii
梅克爾多元癌細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 FBXO24 FBXO24蛋白抗體堿性品紅水溶液(1%)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
hnRNP A2B1 異質(zhì)核糖核蛋白hnRNPA2抗體藜蘆醇Veratryl alcohol中藥標準品 分 子 式: C9H12O3 分 子 量: 168.18978
hnRNP U 異質(zhì)核糖核蛋白U抗體豆腐果新苷BHelicianeoide B化學標準品 分 子 式: C32H38O20 分 子 量: 742.632120000001
AIM1L 缺失樣蛋白1抗體γ-倒捻子素1,3,6,7-Tetrahydroxy-2,8-bis(3-methylbut-2-en-1-yl)-9H-xanthen-9-one化學標準品 分 子 式: C23H24O6 分 子 量: 396.43306
AHNAK2 AHNAK核蛋白2抗體山梨醇溶液(1mol/L)標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
AGXT2L2 AGXT2L2蛋白抗體丹參醇BTanshinol B化學標準品 分 子 式: 分 子 量:
AER61 未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體莨菪堿L-Hyoscyamine中藥標準品 分 子 式: C17H23NO3 分 子 量: 289.37
