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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3801
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3801
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

Marteilia spp.

LZR3801

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

棉毛狀嗜熱霉CCL14 (Chemokine C-C-Motif Ligand 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Thermomyces lanuginosus

釀酒酵母SPTβN4 (Spectrin Beta, Non Erythrocytic 4) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

AlbidiferaxSDC4 (Syndecan 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Albidiferax sp.

釀酒酵母PCX (Podocalyxin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

矮小微桿菌HBμ (Hemoglobin, Mu) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium pygmaeum

乳酪短桿菌HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacterium casei

pMIR-Report LuciferasePSPN (Persephin) ELISA Kit拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21

三葉草根瘤菌AP36 (Apelin 36) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮

三葉草葉桿菌CCSA-2 (Colon Cancer Specific Antigen-2) ELISA Kit拉丁屬名: Phyllobacterium trifolii

乳酸鏈球菌P-GP (Permeability Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptococcus lactis(Lister) Lohnis

缺陷短波單胞菌ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

大豆慢生根瘤菌CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.4生長

土曲霉原變種EK (Eepidermal Keratin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus terreus var. terreus

芽胞桿菌NAGLU (N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

慢生根瘤菌TACR1 (Tachykinin Receptor 1) ELISA Kit 用途: 與花生共生固氮良好
馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒 ODZ3/Teneurin 3  固生蛋白3抗體甘草苷元-7-O-D-芹糖-4'-O-D-葡萄糖苷Liquiritin apioside中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C26H30O13 分 子 量: 550.51

ACCSL  ACCSL蛋白抗體甲氧芐啶Trimethoprim抗生素類 分 子 式: C14H18N4O3 分 子 量: 290.32

FAM135B  FAM135B蛋白抗體山奈酚-3-O-β-D-槐糖苷Kaempferol-3-O-sophoroside中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C27H30O16 分 子 量: 610.518

FAM166A  FAM166A蛋白抗體海罌粟堿B11H,13H-Oxireno[d]pyrano[4',3':3,3a]isobenzofuro[5,4-f][2]benzopyran-4,6,13(2H,*H)-trione,3-(acetyloxy)-8-(3-furanyl)decahydro-2,2,4a,8a-tetramethyl-,(2aR,3S,4aR,4bR,*S,8S,8aS,10aR,10bR,14aS)- (9CI)對照藥材 分 子 式: C28H32O10 分 子 量:

HIDE1/C19orfC38  19號染色體開放閱讀框38抗體D-四氫藥根堿5,8,13,13a-tetrahydro-2,9,10-trimethoxy-6H-Dibenzo[a,g]quinolizin-3-ol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C20H23NO4 分 子 量: 341.40092

HIG1/HIGD1A  缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體華蟾酥毒基Cinobufagin中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C26H34O6 分 子 量: 442.54456

HIP1R/HIP12/HIP3  亨丁頓舞蹈癥相互作用蛋白12抗體Raddeanoside 20Raddeanoside 20中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式:  分 子 量:

 


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