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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
綿羊莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3820
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-17
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3820
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

綿羊莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Moraxella ovis

LZR3820


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

短桿狀馬賽菌GEF (Guanylate Exchange Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia  brevitalea

西奈青霉CDNF (Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium sinaicum

鏈霉菌NOS1/nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces radiopugnans Mao et al.

哈茨木霉Preptin ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma harzianum

松鼠葡萄球菌松鼠亞種FTL (Ferritin, Light Polypeptide) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

紅色紅曲霉BANP (BTG3 Associated Nuclear Protein) ELISA Kit  拉丁屬名: Monascus  ruber

根瘤菌RNASEN (Ribonuclease III, Nuclear) ELISA Kit用途: 固氮

大豆慢生根瘤菌STK39 (Serine/Threonine Kinase 39) ELISA Kit用途: 益生菌

黑腐皮殼菌GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

中華根瘤菌CLDN14 (Claudin 14) ELISA Kit用途: 分類、研究,具有 固氮生物肥料潛力。

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種DBP (Vitamin D Binding Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens

竹喙球菌TP63 (Tumor Protein p63) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

猴頭菇GPIIb/IIIa (Platelet Membrane Glycoprotein IIb/IIIa) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鏈格孢PDCN (Podocin) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria alternata

釀酒酵母ANGPTL3 (Angiopoietin Like Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
綿羊莫拉菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商IGSF6  免疫球蛋白超家族成員6抗體連翹酯苷BForsythoside B中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C34H44O19 分 子 量: 756.70176

IGSF9  疫球蛋白超家族成員9抗體芒柄花黃素7-Hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-4H-chromen-4-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C16H12O4 分 子 量: 268.26408

IGSF10  免疫球蛋白超家族成員10抗體乙酰蝙蝠葛蘇林堿中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式:  分 子 量:

IGSF11  大腦和睪丸特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體谷氨酸單鈉鹽Monosodium Glutamate中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C5H8NO4-.Na+ 分 子 量: 169.11112

IGSF12/CD300  免疫球蛋白超家族成員12抗體蒲公英賽醇Taraxerol中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C30H50O 分 子 量: 426.7174

IGSF16/CD300C  免疫球蛋白超家族成員16抗體重樓皂苷Fa-L-Mannopyranoside, (3b,25R)-spirost-5-en-3-ylO-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®3)-O-[6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®4)]-O-[b-D-glucopyranosyl-(1®2)]-6-deoxy-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C51H82O20 分 子 量: 1015.18478

IGSF21  免疫球蛋白超家族成員21抗體異蓮心堿Isoliensinine中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C37H42N2O6 分 子 量: 610.747

 


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