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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3853
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-17
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3853 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 | Mycoplasma agalactiae | LZR3853 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
室內(nèi)外電子溫濕度計TR (Testosterone Receptor) ELISA Kit規(guī)格: 微型便攜式
堅強芽孢桿菌DMD (Dystrophin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
黃孢原毛平革菌NTXI (Cross Linked N-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Phanerodontia chrysosporium
綠色木霉BAFF/CD257/TNFSF13B (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
檸檬黃色紅色桿菌MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Erythrobacter citreus
橙黃紅酵母CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula aurantiaca
季也蒙假絲酵母GC (Glycocalicin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida guilliermondii
釀酒酵母GzmB (Granzyme B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
黑木耳NUP153 (Nucleoporin 153kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Auricularia auricula
黑腐皮殼菌ACTN3 (Actinin Alpha 3) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蠟狀芽孢桿菌ELA2B (Elastase 2B) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
解脂耶氏酵母PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 拉丁屬名: Yarrowia lipolytica
球托霉菌屬w5菌株CFB (Complement Factor B) ELISA Kit 拉丁屬名: Gongronella sp.
孟氏假單胞菌PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas mandelii
根瘤菌FcαR/CD89 (Receptor I for the Fc Fragment of IgA) ELISA Kit用途: 固氮
無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒 BMP10 骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體TerameprocolTerameprocol化學(xué)標準品 分 子 式: C22H30O4 分 子 量: 358.47
TSPAN9/NET-5 四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體(+/-)-兒茶精2-(3,4-Dihydroxyphenyl)chroman-3,5,7-triol化學(xué)標準品 分 子 式: C15H14O6 分 子 量: 290.26806
TET2 甲基雙加氧酶TET2抗體去氫苦木堿Kumujian G對照藥材 分 子 式: C15H14N2O2 分 子 量: 254.28386
5 MethylCytosine 5甲基胞嘧啶抗體無梗五加苷BEleutheroside E1中藥標準品 分 子 式: C28H36O13 分 子 量: 580.57764
FOG1 GATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體L-谷氨酰胺L-Glutamine氨基酸類 分 子 式: C5H10N2O3 分 子 量: 146.1445
RGS4 相關(guān)蛋白9抗體Triton X-100細胞裂解液標準滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
GPBB/PYGB 腦糖原磷酸化酶抗體紫羅蘭酮4-(2,6,6-Trimethylcyclohex-1-en-1-yl)but-3-en-2-one中藥標準品 分 子 式: C13H20O 分 子 量: 192.2973
