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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3911
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3911 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Orf Virus(ORFV) | LZR3911 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
三線鐮刀菌PS1 (Presenilin 1) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物
糊精乳桿菌PACAP-38 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus dextrinicus
野生金針菇(白色)PACAP-27 (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 27) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
中華根瘤菌ApoB48 (Apolipoprotein B48) ELISA Kit用途: 在無機(jī)鹽培養(yǎng)基中以為碳源培養(yǎng)，6天內(nèi)可在固體培養(yǎng)基上形成透明的水解圈。
根瘤菌hs-CRP (high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit用途: 固氮
黑曲霉cGMP(cyclic guanosine monophosphate)ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus niger
大腸埃希菌拉丁屬名: coli
威林格氏線黑粉菌C3 (Complement Component 3) ELISA Kit拉丁屬名: Cryptococcus wieringae
釀酒酵母IgG (Immunoglobulin G) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
串珠鐮刀菌*cTn-I/TNNI3 (cardiac Troponin I) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
刺毛殼MYO (Myoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium spinosum
莖點(diǎn)霉屬IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
漸綠木霉NGF (Nerve Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma viridescens
棒狀桿菌屬TCC C5b-9 (Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit拉丁屬名: Corynebacterium sp.
多變毛霉PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor ) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor abundans
羊病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Calpastatin 英文名稱： 鈣蛋白酶抑制蛋白 0.1ml
Anti-KLRF1/NKp80 細(xì)胞毒性受體NK-p80Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
P53 人P53蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cullin/C10orf46 CULLINMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激酶 規(guī)格 0.1ml
Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A 96T
TNFAIP5 英文名稱： 壞死因子α誘導(dǎo)蛋白5 0.1ml
C9orf30 英文名稱： 9號(hào)染色體開放閱讀框30 0.2ml
Anti-PLG 纖維蛋白溶酶原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GKRP(Human glucokinase regulatory protein) ELISA Kit 人葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MCM2 染色體維持缺陷蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh JMJD6 凋亡細(xì)胞清除受體 規(guī)格 0.2ml
ANG ELISA Kit 大鼠生長素 96T
phospho-PKC Epsilon(Ser729) 英文名稱： 磷酸化蛋白激酶C/p-PKC ε 0.1ml
大鼠尿激酶(UK)ELISA試劑盒英文名稱：Rat urokinase,UK ELISA Kit進(jìn)口/分裝
Anti-ABCA1/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-EDG4/LPA2/FITC 熒光素標(biāo)記溶血磷脂酸受體蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh CTAGE6 CTAGE6蛋白 規(guī)格 0.2ml
Melamine/BSA 三聚氰胺與血清白蛋白偶聯(lián)物 1mg
ZFP103 英文名稱： 鋅指蛋白103 0.2ml
Rhesus antibody Rh VEGF-D 內(nèi)皮生長因子D型 規(guī)格 0.1ml
CESK1 英文名稱： 分子伴侶CESK1蛋白 0.2ml
Anti-BFGFR/FGFR1 堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PCNA 小鼠增殖細(xì)胞核抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-FGF1/AFGF 酸性成纖維細(xì)胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG 小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 1mg
Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 人他克莫司 96T
SH3KBP1 英文名稱： SH3結(jié)構(gòu)域激酶結(jié)合蛋白1 0.1ml
