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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
奧斯特奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3919
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3919
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

奧斯特奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Ostertagia ostertagi

LZR3919

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

阿維菌素鏈霉菌LDHC (Lactate Dehydrogenase C) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces avermitilis

大腸埃希氏桿菌OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit  拉丁屬名: Escherichia  coli

蚜蟲莫氏黑粉菌BAK1 (Bcl2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit拉丁屬名: Moesziomyces aphidis

樟疫霉GRα (Glucocorticoid Receptor Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

楊生盾殼霉C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit 用途: 植物病原物;用于該菌種群演化與流行學(xué)監(jiān)測(cè)。

Lysinibacillus xylanilyticusMAT (Matrilysin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

尖孢鐮孢M-AChR (Muscarinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum

蝙蝠蛾擬青霉MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Paecilomyces hepiali

泡盛曲霉MMP-13 (Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori Nakazawa

釀酒酵母F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

釀酒酵母BK (Bradykinin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

大腸埃希氏菌PLAA (Phospholipase A2 Activating Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

混料芽孢桿菌AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus farraginis

麥根腐平臍蠕孢β Manase ELISA Kit用途: 教學(xué)科研

黑木耳MCAM  (Melanoma Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
奧斯特奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-AKT1 (Thr72) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶AKT1 0.1ml

Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

CD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-CCRK/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期相關(guān)激酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh E-cadherin/CD324 上皮鈣粘附分子 規(guī)格 0.1ml

BMPs (Rabbit bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 兔骨形成蛋白 96T

MMP19 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶18/19 0.2ml

C9orf57 英文名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框57 0.2ml

Anti-PKC delta 蛋白激酶C亞性D型Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離特異性抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-MO25 alpha/CAB39 鈣結(jié)合蛋白39Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KCTD11 鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11 規(guī)格 0.2ml

ER ELISA Kit 大鼠雌二醇受體 96T

PAR3 英文名稱: 蛋白酶激活受體3 0.1ml

Endothelin-1 內(nèi)皮素-1(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 英文名稱:Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒英文名稱:Human Candida Albicans,C.albicans ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒 英文名稱:Human leukocyte exastase,HLE ELISA Kit特價(jià)促銷

人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

LIF peptide 抑制因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

CFHL5 英文名稱: 補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白5 0.1ml

Anti-HCV-NS4a 病毒-NS4aMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

MIC-1 human ELISA kit 人巨噬細(xì)胞抑制因子-1 ELISA 試劑盒Multi-class antibodies規(guī)格: 96T

Anti-Glypican 4 磷脂?;嫉鞍拙厶?4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.3ml

ES-Ab(Human anti-Endostatin antibody) ELISA Kit 人內(nèi)皮抑素 96T

Ribonuclease Inhibitor 英文名稱: 核糖核酸酶抑制因子1 0.2ml


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