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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3919
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3919 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
奧斯特奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Ostertagia ostertagi | LZR3919 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
阿維菌素鏈霉菌LDHC (Lactate Dehydrogenase C) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces avermitilis
大腸埃希氏桿菌OSCAR (Osteoclast Associated Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
蚜蟲莫氏黑粉菌BAK1 (Bcl2 Antagonist/Killer 1) ELISA Kit拉丁屬名: Moesziomyces aphidis
樟疫霉GRα (Glucocorticoid Receptor Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
楊生盾殼霉C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit 用途: 植物病原物;用于該菌種群演化與流行學(xué)監(jiān)測(cè)。
Lysinibacillus xylanilyticusMAT (Matrilysin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
尖孢鐮孢M-AChR (Muscarinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium oxysporum
蝙蝠蛾擬青霉MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Paecilomyces hepiali
泡盛曲霉MMP-13 (Matrix Metalloproteinase 13) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori Nakazawa
釀酒酵母F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母BK (Bradykinin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希氏菌PLAA (Phospholipase A2 Activating Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
混料芽孢桿菌AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus farraginis
麥根腐平臍蠕孢β Manase ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
黑木耳MCAM (Melanoma Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
奧斯特奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書phospho-AKT1 (Thr72) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶AKT1 0.1ml
Anti-phospho-ASK1(Thr845) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、小鼠磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD3(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD3分子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCRK/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期相關(guān)激酶IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E-cadherin/CD324 上皮鈣粘附分子 規(guī)格 0.1ml
BMPs (Rabbit bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 兔骨形成蛋白 96T
MMP19 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶18/19 0.2ml
C9orf57 英文名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框57 0.2ml
Anti-PKC delta 蛋白激酶C亞性D型Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離特異性抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-MO25 alpha/CAB39 鈣結(jié)合蛋白39Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCTD11 鉀通道四聚體結(jié)構(gòu)域蛋白11 規(guī)格 0.2ml
ER ELISA Kit 大鼠雌二醇受體 96T
PAR3 英文名稱: 蛋白酶激活受體3 0.1ml
Endothelin-1 內(nèi)皮素-1(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒 英文名稱:Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒英文名稱:Human Candida Albicans,C.albicans ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒 英文名稱:Human leukocyte exastase,HLE ELISA Kit特價(jià)促銷
人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒英文名稱:Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
LIF peptide 抑制因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CFHL5 英文名稱: 補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白5 0.1ml
Anti-HCV-NS4a 病毒-NS4aMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MIC-1 human ELISA kit 人巨噬細(xì)胞抑制因子-1 ELISA 試劑盒Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-Glypican 4 磷脂?;嫉鞍拙厶?4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Bov IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗IgG 規(guī)格 0.3ml
ES-Ab(Human anti-Endostatin antibody) ELISA Kit 人內(nèi)皮抑素 96T
Ribonuclease Inhibitor 英文名稱: 核糖核酸酶抑制因子1 0.2ml