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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3921
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3921 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
奧斯特線蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Ostertagia spp. | LZR3921 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
微白黃鏈霉菌COL7 (Collagen Type VII) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces albidoflavus
細(xì)極鏈格孢HP (Haptoglobin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
米根霉LH (Luteinizing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus oryzae
三棱孢小囊菌PDXK (Pyridoxal Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Microascus trigonosporus
沙福芽孢桿菌OPN (Osteopontin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus safensis
粘質(zhì)皮狀新絲孢酵母TDT (Terminal Deoxynucleotidyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Cutaneotrichosporon mucoides
熒光假單胞菌RUNX2 (Runt-Related Transcription Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens
枯草芽孢桿菌PC/CPG (Choline Phosphoglyceride) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
泡盛曲霉HNRPU (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus awamori Nakazawa
灰銹赤鏈霉菌PKCθ (Protein Kinase C Theta )ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces griseorubiginosus
釀酒酵母LIF (Leukemia Inhibitory Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
野別樣希瓦氏菌ET-1 (Endothelin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Alishewanella agri
科貝特氏菌屬RAPGEF1 (Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cobetia crustatorum
紅色紅菇EM2 (Endomorphin 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
青紫鏈霉菌CNR1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit 拉丁屬名: Syntrophomonas glaucoviolaceus
奧斯特線蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 DCTN6 英文名稱： 動(dòng)力蛋白激活蛋白6 0.2ml
EPHB4 EphB4 兔單抗 (PE) Human
EGFR 英文名稱： 表皮生長(zhǎng)因子受體 0.1ml
磷脂酰肌醇激酶 Anti-PI3K/P85 alpha 0.1ml
Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYL9(Thr19) 磷酸化肌球蛋白輕鏈9 規(guī)格 0.1ml
Ang- II (Angiotensin II ) 緊張素II抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
C9orf61 英文名稱： 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61 0.2ml
Anti-sFRP-4 子宮內(nèi)膜Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
sTNF Alpha-RII(humen) 大鼠可溶性壞死因子-受體2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-DTNBP1 易感基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NBL1/DAND1 神經(jīng)母細(xì)胞瘤抑瘤蛋白1 規(guī)格 0.1ml
Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷3a 96T
SMAGP 英文名稱： 小細(xì)胞跨膜糖化蛋白 0.1ml
兔過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 特價(jià)促銷
Snake poison Protein 蛇毒蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD272/BTLA B和T淋巴細(xì)胞衰減蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAK1 p21激活激酶1 規(guī)格 0.1ml
AGT Kit Human 人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT ELISA配對(duì) ELISA
TTC33 英文名稱： TTC33蛋白 0.2ml
C6orf58 英文名稱： 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58 0.2ml
c-fos 英文名稱： c-fos 0.1ml
Anti-Plexin B1 神經(jīng)叢蛋白B1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MMP-24 基質(zhì)金屬蛋白酶-24Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin beta 7 整合素β7 規(guī)格 0.1ml
anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgM antibody) ELISA Kit 人IgM 96T
PIBF1 英文名稱： 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1 0.2ml
