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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3932
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3932 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
副球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Paracoccidioides brasiliensis | LZR3932 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
鏈霉菌C5 (Complement Component 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces sp.
芽孢桿菌CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
茯苓CKMT1B (Creatine Kinase, Mitochondrial 1B ) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌HSP-60/HSPD1 (Heat Shock Protein 60) ELISA Kit拉丁屬名: Stenotrophomonas maltophilia
戊糖乳桿菌ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
側(cè)耳Bcl-2 (B-cell Leukemia/Lymphoma 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pleurotus sp.
嗜冷德沃斯氏菌TGF-β3 (Transforming Growth Factor β3) ELISA Kit 拉丁屬名: Devosia psychrophila
釀酒酵母OCT (Ornithine Carbamoyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
長枝木霉PRL (Prolactin) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum
芽胞桿菌LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit用途: 教學(xué)科研
*蛹蟲草SCTR (Secretin Receptor) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)吲哚薩頓菌Grb7 (Growth Factor Receptor Bound Protein 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Suttonella indologenes
施氏假單胞菌CRN (Corin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas stutzeri
芽孢桿菌LTA4H (Leukotriene A4 Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
嗜鹽鹽單胞菌MAGE (Melanoma-associated Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas halophila
副球孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Amisyn 英文名稱： 突觸融合結(jié)合蛋白6 0.2ml
Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠T淋巴細(xì)胞連接蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
TNFsR- II ELISA Kit 大鼠壞死因子可溶性受體ⅡMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Annexin III /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 ⅢIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FANCF 范可尼相關(guān)蛋白F 規(guī)格 0.2ml
ICAM-3/CD50(Human intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit 人細(xì)胞間粘附分子3 96T
MFAP3L 英文名稱： 微絲相關(guān)蛋白3樣 0.1ml
C9orf84 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框84 0.2ml
Anti-PNK1/PNKP 多聚合苷酸激酶3磷酸化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MSK1 有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin alpha 2/CD49b 整合素α2 規(guī)格 0.1ml
S100A8(human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A 96T
P311 protein 英文名稱： 神經(jīng)再生相關(guān)蛋白 0.1ml
Human Cartilage glycoprotein 39,HC gp-39 ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39 96T
TRIM35 英文名稱： TRIM35蛋白 0.1ml
CENPQ 英文名稱： 著絲粒蛋白Q 0.1ml
Anti-C-SKI/v-SKI C-SKIMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Neuroglobin,NGB ELISA Kit特價供應(yīng)
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit特價促銷
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit特價促銷
CH25H 英文名稱： 膽固醇25羥化酶 0.2ml
Anti-ELK1 細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Collagen I 大鼠I型膠原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-DISC1 (CT) DISC1 C端Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NDRG4 基因NDRG4 規(guī)格 0.2ml
Human Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 人免疫球蛋白G 96T
Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 英文名稱： 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1 0.1ml
