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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
雙??虏《咎结樂晒舛縋CR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3935
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3935
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

雙??虏《咎结樂晒舛縋CR試劑盒說明書

Parechovirus(PeV)

LZR3935

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

水管致黑棲熱菌cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Thermus scotoductus

爪哇青霉C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium javanicum

紫色紅曲TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus  purpureus

大腸埃希氏菌CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli

釀酒酵母HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae

芽孢八疊球菌屬BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit  拉丁屬名: Sporosarcina  sp.

蠟狀芽孢桿菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

美澳型核果褐腐病菌CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假臍菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌CLEC4E (C-Type Lectin Domain Family 4 Member E) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

肉色迷孔菌CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Daedalea dickinsii

普利茅斯沙雷氏菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

魯考弗美奇酵母BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Metschnikowia  reukaufii

檸檬兩面神菌NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit拉丁屬名: Janibacter  melonis

深藍(lán)紫色桿菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁屬名: Janthinobacterium  lividum
雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書AGT 英文名稱: 緊張素原 0.1ml

Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、CIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗激素/加壓素/精氨酸加壓素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白16IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EEF2 真核翻譯延長因子2 規(guī)格 0.2ml

Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 魚類超敏C反應(yīng)蛋白 96T

MRAP2 英文名稱: 黑素皮質(zhì)素2受體輔助蛋白2 0.2ml

C9orf86 英文名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框86 0.2ml

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人素D合成酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IDH1/Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶1 規(guī)格 0.2ml

LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T

PCDH11Y 英文名稱: 原鈣粘附蛋白11Y 0.2ml

Anti-c-Abl 非受體酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 英文名稱: 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1+B2 0.1ml

酪氨酸激酶C Anti-Trk C 0.2ml

Anti-TREM1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2 規(guī)格 0.1ml

BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

CHAD 英文名稱: 富含亮酸軟骨蛋白 0.1ml

Anti-Hck 造血細(xì)胞激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝素輔因子ⅡMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化熱休克蛋白27Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MARVELD1 候選抑制基因MARVELD1 規(guī)格 0.2ml

MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T

RNF 英文名稱: E3泛素蛋白連接酶A 0.2ml

 


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