- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3935
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3935 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
雙??虏《咎结樂晒舛縋CR試劑盒說明書 | Parechovirus(PeV) | LZR3935 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
水管致黑棲熱菌cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Thermus scotoductus
爪哇青霉C5c (Complement C5 Convertase) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium javanicum
紫色紅曲TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus purpureus
大腸埃希氏菌CNTN1 (Contactin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
釀酒酵母HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae
芽孢八疊球菌屬BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Sporosarcina sp.
蠟狀芽孢桿菌MCP-4/CCL13 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
美澳型核果褐腐病菌CDK4 (Cyclin Dependent Kinase 4) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
假臍菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌CLEC4E (C-Type Lectin Domain Family 4 Member E) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
肉色迷孔菌CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Daedalea dickinsii
普利茅斯沙雷氏菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
魯考弗美奇酵母BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit 拉丁屬名: Metschnikowia reukaufii
檸檬兩面神菌NPYR2 (Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit拉丁屬名: Janibacter melonis
深藍(lán)紫色桿菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁屬名: Janthinobacterium lividum
雙埃柯病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書AGT 英文名稱: 緊張素原 0.1ml
Anti-Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠有絲分裂激酶A、B、CIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗激素/加壓素/精氨酸加壓素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞炎性蛋白16IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EEF2 真核翻譯延長因子2 規(guī)格 0.2ml
Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 魚類超敏C反應(yīng)蛋白 96T
MRAP2 英文名稱: 黑素皮質(zhì)素2受體輔助蛋白2 0.2ml
C9orf86 英文名稱: 9號(hào)染色體開放閱讀框86 0.2ml
Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人素D合成酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IDH1/Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶1 規(guī)格 0.2ml
LPL(Mouse lipoprotein lipase)ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶 96T
PCDH11Y 英文名稱: 原鈣粘附蛋白11Y 0.2ml
Anti-c-Abl 非受體酪氨酸激酶c-AblMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594) 英文名稱: 磷酸化酪酸蛋白激酶受體B1+B2 0.1ml
酪氨酸激酶C Anti-Trk C 0.2ml
Anti-TREM1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IRS-1(Ser307) 磷酸化胰島素受體底物p-IRS-1/2 規(guī)格 0.1ml
BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒英文名稱:Human Na+/H+ exchanger 3,NHE3 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CHAD 英文名稱: 富含亮酸軟骨蛋白 0.1ml
Anti-Hck 造血細(xì)胞激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HHC II (uman heparin cofactor II ) ELISA Kit 人肝素輔因子ⅡMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-HSP27 (Ser82) 磷酸化熱休克蛋白27Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MARVELD1 候選抑制基因MARVELD1 規(guī)格 0.2ml
MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 96T
RNF 英文名稱: E3泛素蛋白連接酶A 0.2ml