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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3940
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3940 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
巴斯德氏桿菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Pasteurella spp. | LZR3940 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
皺孢鏈霉菌RNASEN (Ribonuclease III, Nuclear) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces scabrisporus
普通變形桿菌MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: vulgaris
哈茨木霉PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma harzianum
紫紅曲霉ACA-IgM (Anti-Cardiolipin Antibody IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus purpureus
環(huán)帶擬盤多毛孢CG (Chorionic Gonadotropin) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis zonata
桔青霉TGM1 (Transglutaminase 1, Keratinocyte) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium citrinum
嗜松青霉Try2 (Trypsinogen II) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium pinophilum
薄花邊傘2-1CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
擴(kuò)展青霉ADAM9 (A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium expansum
鐮刀菌ATXN2 (Ataxin 2) ELISA Kit 用途: 教學(xué)科研
串珠鐮刀菌*PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
煙酸芽孢桿菌MUC13 (Mucin 13) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus niacini Nagel and Andreesen
釀酒酵母NP (Nandrolone Phenylpropionate) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
淡黃濕傘CDNF (Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球孢枝孢CDT (Carbohydrate Deficient Transferrin) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium sphaerospermum
巴斯德氏桿菌屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商ADORA1 英文名稱： 腺苷A1A受體 0.2ml
Anti-CD272/BTLA/FITC 熒光素標(biāo)記B和T淋巴細(xì)胞衰減蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
RANTES/CCL5 ELISA kit 大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FASN/Fatty Acid Synthase 1 脂肪酸合成酶 規(guī)格 0.1ml
IL1Ra ELISA Kit 大鼠白介素1受體拮抗劑 96T
MHC Class II 英文名稱： 組織相容性復(fù)合體β 0.1ml
CA I 英文名稱： 碳酸酐酶1 0.2ml
Anti-NGB 腦紅蛋白/神紅蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白重鏈Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 磷酸化原癌基因c-RafMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HAGHL 羥基酰谷胱甘肽水解酶樣蛋白 規(guī)格 0.2ml
HSP-40 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白40 96T
p53R2 英文名稱： 核苷酸還原酶M2B 0.1ml
EpCAM 英文名稱： 上皮特異性抗原 0.1ml
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2 Anti-STAT2 0.2ml
anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光素標(biāo)記視黃酸受體應(yīng)答蛋白2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關(guān)蛋白2 規(guī)格 0.1ml
Nociceptin receptor 孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱：Human C-telopeptide of type Ⅰ collagen，CTX-Ⅰ ELISA Kit特價(jià)促銷
人Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen，NTX ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
CHCHD3 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3 0.1ml
Anti-Beta-HCG 人β亞基人絨毛膜激素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
MTL(Human Motilin) ELISA Kit 人活性腸肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ICAD/DFF-45 Beta Caspase激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAP-9 微管相關(guān)蛋白9 規(guī)格 0.2ml
DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣3 96T
RNF213 英文名稱： 環(huán)指蛋白213 0.1ml
