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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR3960
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR3960 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
美人魚發(fā)光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Photobacterium damselae | LZR3960 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
蠟樣芽孢桿菌PLD2 (Phospholipase D2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
棱柱散尾菌中華變型PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit用途: 藥用
植物乳桿菌MYC (V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
*美味牛肝菌EXT1 (Exostoses 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌MT (Melatonin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
產(chǎn)朊假絲酵母MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Candida utilis
水棲黃桿菌FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
直絲紫鏈霉菌cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces rectiviolaceus
脂肪桿菌PTGS1 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
季也蒙假絲酵母果生變種15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) ELISA Kit拉丁屬名: Candida guilliermondii var. carpophila
西弗冠孢酵母RXFP1 (Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
德氏乳桿菌MAPτ (Microtubule Associated Protein Tau/Tau Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii
小單孢菌MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性。
鼠李糖乳桿菌NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus rhamnosus
嗜乙酰乙酸棒桿菌PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium acetoacidophilum
美人魚發(fā)光桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Arginase II 英文名稱: 精酸酶2 0.1ml
Anti-Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 熒光素標(biāo)記芳香烴受體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Bim(phospho Ser87)/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERAB/HSD17B10 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白 規(guī)格 0.1ml
sCD28(human soluble cluster of differentiation 28) ELISA Kit 人可溶性CD28 96T
MMP-2 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶-2 0.1ml
CACNA1F 英文名稱: 鈣離子通道a1F亞型 0.1ml
Anti-NUMB 膜相關(guān)蛋白NumbMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HBV preS2Ab(Human hepatitis B virus) ELISA Kit 人病毒前S2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-KLK10 激肽釋放酶10Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Laminin B2 gamma 1 層粘連蛋白B2γ1 規(guī)格 0.1ml
BDNF ELISA Kit 大鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 96T
PAR4 英文名稱: 蛋白酶激活受體4 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CAMK2G (Ter286) 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶CAMK2G 規(guī)格 0.1ml
酸性磷酸酶的阻斷劑 10ml Sigma原料
VMAT2 英文名稱: 腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 0.2ml
DSCC1 英文名稱: DSCC1蛋白 0.2ml
Anti-Aggrecan2/ADAMTS-5 軟骨蛋白聚糖Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EPCR 英文名稱: 內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體 0.2ml
細(xì)胞表面趨化因子受體2/5 Anti-CCR-2/5 0.1ml
Chimaerin 2 英文名稱: 嵌合蛋白2/β2-chimaerin 0.1ml
Anti-HBA1/Alpha globin 血紅蛋白α1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-11(Human Interleukin 11) ELISA KIT 人白介素11Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GRK1 G蛋白偶合受體激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MOG 髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白 規(guī)格 0.1ml
GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物 96T
Rho GTPase activating protein 29 英文名稱: Rho GTP酶激活蛋白29 0.2ml