- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3964
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3964 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Plasmodium gallinaceum | LZR3964 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
小孢擬盤多毛孢PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis microspora
枯草芽孢桿菌PDGFRβ (Platelet Derived Growth Factor Receptor Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
皺褶假絲酵母GHITM (Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Candida rugosa
米曲霉ELA2B (Elastase 2B) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae
杰丁塞伯林德納氏酵母α-GST (α-glutathione S-transferases) ELISA Kit拉丁屬名: Cyberlindnera jadini
擬卵蓋鵝膏菌COL8α1 (Collagen Type VIII Alpha 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
桃葉點(diǎn)霉CA4 (Carbonic Anhydrase IV) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
帚霉CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
根瘤菌LAP (Leucine Aminopeptidase) ELISA Kit用途: 固氮
新疆鹽地桿菌TU3A (TU3A Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
鹽古桿菌MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Natrinema sp.
紅色雷夫松氏菌GDNF (Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Leifsonia rubra
大腸埃希菌APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit拉丁屬名: coli
旋絲毛殼αFP (Alpha-Fetoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium bostrychodes
酒質(zhì)安全快檢箱 (清單見備注)RNASET2 (Ribonuclease T2) ELISA Kit 規(guī)格: JC-2型
雞探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商C21orf69 英文名稱: 21號染色體開放閱讀框69 0.2ml
Anti-CCR-2/5/CD192 細(xì)胞表面趨化因子受體2/5Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
IASPP(inhibitory member of the ASPP family) 細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個成員(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Integrin beta 2/CD18/LFA-1 整合素β2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh PANK3 泛酸激酶3 規(guī)格 0.2ml
F7 Kit Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 ELISA配對 ELISA
TNFSF14 英文名稱: 壞死因子配體超家族成員14 0.1ml
CACNA2 英文名稱: 鈣通道L型α2多肽 0.2ml
Anti-PAI-2 纖溶酶原激活物抑制因子2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TH(Human tyrosine hydroxylase) ELISA Kit 人酪氨酸羥化酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100 細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-1R1/CD121a/IL1 Receptor I 白介素1受體1 規(guī)格 0.1ml
LEP ELISA kit 大鼠瘦素 96T
Phospho-PLC gamma 1(Tyr775) 英文名稱: 磷酸化磷酯酶Cγ1 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr134) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl 規(guī)格 0.1ml
Triton-X100 100ml 進(jìn)口分裝
Vimentin 英文名稱: 波形蛋白 0.1ml
phospho-DOK1 (Tyr398) 英文名稱: 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白1 0.1ml
Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1586) 磷酸化間變型激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
phospho-eIF4EBP1 (Ser64) 英文名稱: 磷酸化4E結(jié)合蛋白1 0.1ml
鼠抗合胞病毒單克隆 anti-RSV 0.1ml
CHK1 英文名稱: 細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1 0.2ml
Anti-IL-10RA 白細(xì)胞介素-10受體aMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OVA sIgE(Human ovalbumin specific IgE) ELISA Kit 人卵清蛋白特異性IgEMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IGF II/IGF2 胰島素樣生長因子-IIMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGEL2 抗原樣基因2 規(guī)格 0.2ml
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 96T
RERG 英文名稱: Ras相關(guān)雌激素調(diào)節(jié)生長抑制蛋白 0.2ml