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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3993
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3993 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Proteus mirabilis | LZR3993 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
長雙歧桿菌Grb14 (Growth Factor Receptor Bound Protein 14) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium longum
釀酒酵母FcγR3B (Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Edaphobacter sp.CKLFSF8 (Chemokine Like Factor Superfamily 8) ELISA Kit拉丁屬名: Edaphobacter sp.
根瘤菌屬HbH (Hemoglobin H) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium sp.
膠孢ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
醋桿菌屬GUCA2A (Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter sp.
Corynebacterium variabile corrig. (Müller ) Collins TSP-4 (Thrombospondin-4) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
病研所芽孢桿菌CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus idriensis
米曲霉平展變種f-Hb (Free Haemoglobin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus oryzae var. effusus
姬松茸1號*PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
木霉MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
尖鐮孢PLA2G4D (Phospholipase A2, Group IV D) ELISA Kit用途: 教學科研
豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS18CCND2 (Cyclin-D2) ELISA Kit規(guī)格: 1ml
APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
蘇云金芽胞桿菌以色列亞種PDGF-BB (Platelet Derived Growth Factor-BB) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍R-250蛋白快速染色液 250ml 自產(chǎn)
ZNF347 英文名稱： 鋅指蛋白347 0.2ml
DAT1 英文名稱： 神經(jīng)細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1 0.2ml
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
eEF1A2 英文名稱： 翻譯延伸因子EF-1 α2 0.2ml
α-輔肌動蛋白4 Anti-α-ACTN4 0.1ml
Calneuron 1 英文名稱： 鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8 0.2ml
Anti-eIF4E 真核翻譯起始因子4EMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IGF-1 大鼠樣生長因子-1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ED-1 外胚層Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MYOZ/MYOZ1 MYOZ 規(guī)格 0.2ml
PA-IgM(Human Platelet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相關(guān)IgM 96T
SNX7 英文名稱： 分選連接蛋白7 0.2ml
CSFV Polyprotein 英文名稱： 病毒 0.1ml
Anti-Chloramphenicol 氯霉素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD34 CD34Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38 規(guī)格 0.1ml
IL18R1 Kit Mouse 小鼠 IL18R1 ELISA配對 ELISA
TMPRSS5 英文名稱： 跨膜絲酸蛋白酶5 0.2ml
Chromogranin B 英文名稱： 嗜鉻粒素B 0.1ml
Anti-Phospho-NMDAR2B (Tyr1472) 磷酸化谷氨酸受體2BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human Pentosidine ELISA Kit 人戊糖素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-LC3A/B 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Ku-80 DNA修復酶Ku-80 規(guī)格 0.1ml
IGF-1 ELISA Kit 大鼠樣生長因子1 96T
Phospho-Pin1 (Ser16) 英文名稱： 磷酸化肽基脯酞順反異構(gòu)酶Pinl 0.1ml
