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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
無綠藻通用探針法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3997
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3997
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

無綠藻通用探針法熒光定量PCR試劑盒

Prototheca spp.

LZR3997


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

茶樹菇P-Cadherin (Cadherin, Placental) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

綠木霉BMPR2 (Bone Morphogenetic Protein Receptor II) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma virens

托姆青霉NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium thomii

松口蘑NUP50 (Nucleoporin 50kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Tricholoma matsutake

蒙氏假單胞菌FGL2 (Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas monteilii

乳酸鏈球菌α-SMA (α-Smooth muscle actin) ELISA Kit用途: 用于制酸奶

德氏乳桿菌IGF-1 (Insulin Like Growth Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii

峽灣嗜冷桿菌MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Psychrobacter  fjordensis

茄鐮孢ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium solani

酒紅鏈霉菌FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces vinaceus Jones

云芝栓孔菌(變色栓菌)IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes versicolor

靈芝屬ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma  sp.

銅綠假單胞菌PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas  Aeruginosa

泰國葡糖桿菌REG3γ (Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma) ELISA Kit 拉丁屬名: Gluconobacter thailandicus

中慢生華癸根瘤菌MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit用途: 與達(dá)烏里黃芪、沙打旺共生固氮
無綠藻通用探針法熒光定量PCR試劑盒 Anti-Collagen X Ⅹ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Nogo R 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體 規(guī)格 0.1ml

Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白 96T

TSHB(2T11) 英文名稱: 促甲狀腺素單克隆 0.1ml

CD93 英文名稱: CD93 0.2ml

Anti-Collagen X Ⅹ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit特價供應(yīng)

Calponin 1 英文名稱: 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1 0.1ml

Anti-CCL24/Eotaxin-2 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

IL-2 人白介素-2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-c-Fos (Thr232) 磷酸化c-fosMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1 規(guī)格 0.2ml

Citrate buffer powders(0.01M pH6.0) packages 檸檬酸鹽緩沖液(抗原熱修復(fù)試劑)(0.01M pH6.0) 1000ml

Phospho-TrkA (Tyr785)+TrkB (Tyr816) 英文名稱: 磷酸化酪酸激酶A 0.1ml

小鼠α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse α2-plasmin inhititor,α2-PI ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit 特價促銷

Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CTNNAL1 粘附分子相關(guān)蛋白a1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh PDCD4 凋亡相關(guān)蛋白4 規(guī)格 0.2ml

CSF1R Kit Human 人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 ELISA配對 ELISA

TSARG2 英文名稱: 形成相關(guān)凋亡蛋白2 0.2ml

CIAPIN1 英文名稱: 細(xì)胞因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1 0.2ml

Anti-CEA 癌胚抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD17 CD17Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAP1/Acid Phosphatase 酸性磷酸酶 規(guī)格 0.2ml

CPB1 Kit Human 人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對 ELISA

Phospho-Tie2 (Tyr992) 英文名稱: 磷酸化生成素受體2 0.1ml

 


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