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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4003
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4003 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Providencia stuarti | LZR4003 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
芽孢桿菌COLEC11 (Collectin Sub-Family Member 11) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
三葉草根瘤菌PDXK (Pyridoxal Kinase) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮
產(chǎn)黃青霉TNF-α (Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
芽孢桿菌屬GSTω1 (Glutathione S Transferase Omega 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
珊瑚鏈霉菌GDF11 (Growth Differentiation Factor 11) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces coralus Dietz
冷海水黃桿菌CD30L (Cluster of Differentiation 30 Lligand) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium frigidimaris
弗雷德里克斯堡假單胞菌TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas frederiksbergensis
墨汁鬼傘FBL (Fibrillarin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
新月彎孢CA153 (Carbohydrate Antigen 153) ELISA Kit用途: 研究
釀酒酵母RGS4 (Regulator of G Protein Signaling 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
熱帶假絲酵母C5b (Complement Fragment 5b) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis
釀酒酵母GROγ (Growth Regulated Oncogene Gamma) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
土星擬威爾酵母subsufficiens變種RUNX2 (Runt-Related Transcription Factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Williopsis saturnus var. subsufficiens
聚生殼菌IL-6(Interleukin 6) ELISA Kit用途: 林木病原菌
弗尼青霉FZD8 (Frizzled Homolog 8) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium phoeniceum
斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CYP46 英文名稱： 膽固醇24S-羥化酶 0.2ml
Anti-Gentamicin 慶大霉素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GDNF 人神經(jīng)膠質(zhì)細胞系衍化神經(jīng)營養(yǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cyclin A 周期素AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NGALR/Slc22A17 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17 規(guī)格 0.1ml
Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人銜接蛋白酶活化因子1 96T
TLR4 英文名稱： Toll樣受體4 0.1ml
CaMK2 alpha 英文名稱： 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α 0.1ml
Anti-PAFR/PTAFR 血小板活化因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
MYO/MB(Human Myoglobin) ELISA Kit 人肌紅蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PAK1 p21激活激酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HPV16-E6 人類狀瘤病毒16 規(guī)格 0.1ml
Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 小鼠游離三甲狀腺原酸 96T
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr751) 英文名稱： 磷酸化血小板源性生長因子受體-B 0.1ml
大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒英文名稱：Rat 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit 進口/分裝
大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒英文名稱：Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit特價促銷
GATA-4(GATA binding factor 4) GATA結(jié)合蛋白4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
EPHB3 EphB3 / HEK2 兔單抗 (PE) Mouse
Rhesus antibody Rh Phospho-DARPP32(Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白 規(guī)格 0.1ml
非預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(14.4-116kDa) 2x1000μl/400次 MBI原裝
Zyxin 英文名稱： 斑聯(lián)蛋白 0.2ml
CINP 英文名稱： CDK2相互作用蛋白 0.2ml
Anti-Phospho-FRA1 (Ser265) 磷酸化FRA-1蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
E2(Ret) 大鼠雌二醇Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-ECE1 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh N acetylglucosamine kinase N-乙酰氨基葡萄糖激酶 規(guī)格 0.2ml
pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit 人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物 96T
Stella 英文名稱： 發(fā)育多能性相關(guān)蛋白3 0.2ml
