- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4010
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4010 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
偽病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Pseudorabies Virus(PrV) | LZR4010 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
扇形側(cè)耳Cyr61 (Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61) ELISA Kit拉丁屬名: Pleurotus flabellatus
粉紅擲孢酵母GM (Gastric Mucin) ELISA Kit拉丁屬名: Sporobolomyces roseus
慢生根瘤菌CD28 (Cluster of Differentiation 28) ELISA Kit 用途: 與胡枝子共生固氮
總狀橫梗霉PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Lichtheimia ramose
人蒼白桿菌RAG-1 (Recombination Activating Gene 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ochrobactrum anthropi
芽孢桿菌DCX (Doublecortin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus sp.
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種CLC (Charcot Leyden Crystal Protein) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
乳微桿菌PSA/KLK3 (Prostate Specific Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium lacticum
黃河張比齊奧氏菌CgA (Chromogranin A/Pancreastatin) ELISA Kit拉丁屬名: Bizionia huanghezhanensis SM1212
生活飲用水 氟ADAM9 (A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 拉丁屬名: 生活飲用水 氟
黑曲霉ECM1 (Extracellular Matrix Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus niger
釀酒酵母MIgD (Membrane IgD) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
半園田頭菇COL6 (Collagen Type VI) ELISA Kit用途: 可食
雞傷寒沙門氏菌TNNT1 (Troponin T Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit拉丁屬名: gallinarum
嗜熱脂肪地芽孢桿菌CAD (Caspase Activated Deoxyribonuclease) ELISA Kit拉丁屬名: Geobacillus stearothermophilus
偽病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CIDEB 英文名稱: 促進凋亡基因 0.2ml
Anti-CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA Kit特價供應(yīng)
小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA Kit特價促銷
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA Kit進口/原裝
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit進口/原裝
小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Crosslaps,Cr ELISA Kit特價促銷
CAP1 英文名稱: CAP1 0.1ml
Anti-CTSG/CG 組織蛋白酶GMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MIP-3 Alpha 人巨噬細胞炎性蛋白-3αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CRMP2 CRMP2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NLRP7 富含亮氨酸重復結(jié)構(gòu)域蛋白7 規(guī)格 0.2ml
Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit 人細胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白 96T
Phospho-Talin (Ser425) 英文名稱: 磷酸化踝蛋白 0.1ml
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 病毒X蛋白(HBxAg)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Beta-Actin β-肌動蛋白(內(nèi)參)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser259) 磷酸化原癌基因c-Raf 規(guī)格 0.1ml
兔抗大鼠IgG純化 1mg/10mg 國產(chǎn)
YAP1 英文名稱: 原癌基因Yes相關(guān)蛋白1 0.2ml
DPYD 英文名稱: 二氫嘧啶脫氫酶 0.2ml
Anti-Beta-Actin β-肌動蛋白(內(nèi)參)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CK II alpha 英文名稱: 絲/蘇酸蛋白質(zhì)激酶II α 0.2ml
Anti-E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ITAC/CXCL11(Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant) ELISA Kit 人干擾素誘導T細胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(兔來源免疫組化用)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-CY5 PE-CY5標記的鼠抗人IgG單克隆 規(guī)格 0.1ml
H2-K1(Human Histocompatibility 2-K1-K region) ELISA Kit 人組織相容性2-K1-K 區(qū) 96T
RYBP 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白1 0.2ml