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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
棘盤瑞氏探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4018
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4018
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

棘盤瑞氏探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格

Raillietina echinobothrida

LZR4018

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

食酸菌屬ADIPOR1 (Adiponectin Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Acidovorax  sp.

淡色生赤殼GHRH (Growth Hormone Releasing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Bionectria ochroleuca

果蔬汁 毒死蜱、 氯菊酯、多效唑、 噠螨靈MRC2 (Mannose Receptor C Type 2) ELISA Kit拉丁屬名: 果蔬汁 毒死蜱、 氯菊酯、多效唑、 噠螨靈

針孢鏈霉菌BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces aculeolatus

枯草芽孢桿菌PRB (Retinoblastoma Tumor Suppressor Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

菜豆擬莖點(diǎn)霉IL-23 p40(Interleukin 23) ELISA Kit拉丁屬名: Phomopsis phaseoli

腸桿菌屬SIGLEC3 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

工業(yè)堿速測包(用于水發(fā)產(chǎn)品)GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit 規(guī)格: 40份樣品試劑用量/包

立枯絲核菌Dyn (Big Dynorphin) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizoctonia  solani

冬蟲夏草MT1E (Metallothionein 1E) ELISA Kit拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis

耐熱鹽土生古菌VLDLR (Very Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Haloterrigena thermotolerans

明尼蘇達(dá)被毛孢TF (Transfer Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Hirsula minnesotensis

枯草芽孢桿菌MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

大腸埃希氏菌CCA (Colon Cancer Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli

球孢白僵菌CTSC (Cathepsin C) ELISA Kit用途: 生防
棘盤瑞氏探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Leptin 瘦素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD2 CD2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAI-2/SerpinB2 纖溶酶原激活物抑制因子2(血漿酶原激活酶抑制因子-2) 規(guī)格 0.1ml

COQ7 Kit Human 人 COQ7 ELISA配對 ELISA

Tsg101 英文名稱: 易感基因101蛋白 0.1ml

C6orf150 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框150 0.1ml

Anti-CD2 CD2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Cappuccino 英文名稱: Cappuccino蛋白 0.2ml

Anti-CD158i NK細(xì)胞抑制性受體2DS4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

HIF-1Alpha (Hypoxia-inducible factor -1Alpha) 缺氧誘導(dǎo)因子1α (抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD166/ALCAM/MEMD 活化白細(xì)胞粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAR3 蛋白酶激活受體3 規(guī)格 0.2ml

TREM2 Kit Human 人 TREM-2 / TREM2 ELISA配對 ELISA

phospho-TPH (Ser260) 英文名稱: 磷酸化色酸羥化酶 0.1ml

人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Elastase ELISA Kit進(jìn)口/原裝

人蛋白C(Protein C)ELISA試劑盒英文名稱:Human Protein C ELISA Kit進(jìn)口/原裝

人蛋白S(Protein S)ELISA試劑盒英文名稱:Human Protein S ELISA Kit進(jìn)口/原裝

L-HDC (L-Histidine decarboxylase) L-組氨酸脫羧酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-Angiotensin II type 1A receptor 緊張素Ⅱ1A型受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CaMK2 alpha (Thr305) 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α 規(guī)格 0.1ml

過氧化物酶阻斷劑B 10ml 推薦用于石蠟切片,孵育10分鐘.

CK15 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白15 0.1ml

Anti-ILTV 雞喉病毒Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Human LDL-IC ELISA Kit 人免疫復(fù)合物Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-IL5RA/CD125 白介素-5受體α鏈Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh LRCH4 富含亮氨酸重復(fù)家庭蛋白4 規(guī)格 0.2ml

Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit 人載脂蛋白E 96T

RELM beta 英文名稱: 相關(guān)基因蛋白(resistin-like β) 0.1ml


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