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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
四角瑞氏探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4020
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-18
  • 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4020
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

四角瑞氏探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商

Raillietina tetragona

LZR4020


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

樹舌CCL14 (Chemokine C-C-Motif Ligand 14) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

冷彎曲菌PRDX2 (Peroxiredoxin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Psychroflexus  sp.

釀酒酵母ETRB (Endothelin Receptor B) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

擲孢酵母GPC3 (Glypican 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

玫煙色擬青霉(10個工作日)NUP85 (Nucleoporin 85kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Paecilomyces  fumosoroseus

黃曲霉PLD2 (Phospholipase D2) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

赤霉菌屬CVNPF (Cobra Venom Neuronal Protective Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Gibberella  sp.

葫蘆小叢殼MMP-17 (Matrix Metalloproteinase 17) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母ProGRP (Pro-Gastrin Releasing Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

枯草芽孢桿菌EPOR (Erythropoietin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

長白山傘枝霉ALDH (Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Umbelopsis changbaiensis

巨大芽孢桿菌NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  megaterium

放射形根瘤菌FGFR4 (Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit 用途: 固氮

阿魏側(cè)耳-天山2號ApoB (Apolipoprotein B) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

淡紫擬青霉26S-PSM (26S Proteasome) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
四角瑞氏探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商Vitamin D Receptor/VDR 英文名稱: 維生素D3受體 0.1ml

phospho-Dnmt1(Ser154) 英文名稱: 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 0.1ml

Anti-AIMP2 AIMP2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Phospho-EGFR (Ser1045) 英文名稱: 磷酸化表皮生長因子受體 0.1ml

可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17 Anti-Slc22A17 0.2ml

Anti-Tenascin/TN /FITC 熒光素標(biāo)記細胞粘合素IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MCAM(Tyr641) 磷酸化細胞粘附分子CD146 規(guī)格 0.1ml

CAPS1 英文名稱: 鈣依賴分泌激活蛋白1 0.2ml

Anti-GADD153 GADD153Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

MSA(Human mitotic spindle apparatus antibody) ELISA Kit 人抗紡錘體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Inhibin beta A 抑制素βAMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LMW Kininogen/Kininogen 1 低分子量生長促進因子(激肽原1) 規(guī)格 0.2ml

Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4) ELISA Kit 人鳥苷酸結(jié)合蛋白4 96T

RGS4 英文名稱: 相關(guān)蛋白9 0.2ml

Anti-Collagen I Ⅰ型膠原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit進口/分裝

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Activin A,ACV-A ELISA Kit進口/原裝

小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA Kit進口/分裝

小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Troponin T,Tn-T ELISA Kit特價促銷

小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Myoglobin,MYO/MB ELISA Kit特價促銷

PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠素F2αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

CK16 英文名稱: 細胞角蛋白16 0.1ml

Anti-Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 磷酸化雌激素受體αMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

cAMP 小鼠環(huán)-磷酸腺苷Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-ER-alpha/beta 雌激素受體α/βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MSH3 錯配修復(fù)蛋白3 規(guī)格 0.2ml

PAPP-A(Human pregnancy associated plasma protein A) ELISA Kit 人相關(guān)血漿蛋白A 96T

phospho-SYT1(Thr202) 英文名稱: 磷酸化突觸結(jié)合蛋白1 0.1ml

 


聯(lián)系方式
手機:13482402338
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