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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4022
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-07
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4022 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
真鯛虹彩病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒規(guī)格 | Red Sea Bream Iridovirus(RSIV) | LZR4022 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
蠟狀芽孢桿菌VacA (Vacuolating Cytotoxin A) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
嗜堿假單胞菌UBE1L (Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas alcalophila
棱柱散尾菌PI3K (Phosphoinositide-3-Kinase) ELISA Kit用途: 食、藥用
榛針孢酵母PRDX1 (Peroxiredoxin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Nematospora coryli
枯草芽孢桿菌UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
MMP-24 (Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
釀酒酵母MCSFR (Macrophage Colony Stimulating Factor Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
解橡膠諾卡氏菌ACVA (Activin A) ELISA Kit拉丁屬名: Nocardia cummidelens
土壤桿菌MYO (Myosin) ELISA Kit用途: 降解
尖鐮孢EP2 (Prostaglandin E Receptor 2 ) ELISA Kit 用途: 藥用植物內(nèi)生菌
德蘭士瓦哈薩克斯坦酵母 IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Kazachstania transvaalensis
Ohtaekwangia koreensisANG II R2/AGTR2 (Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Ohtaekwangia koreensis
泳池鞘氨單胞菌TUBα3C (Tubulin Alpha 3c )ELISA Kit 拉丁屬名: Sphingomonas natatoria
釀酒酵母 MSLN (Mesothelin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大腸埃希氏桿菌CSF2Rβ (Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
真鯛虹彩病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒規(guī)格Ephrin B 英文名稱: Ephrin B 0.1ml
轉(zhuǎn)錄因子7類似物2 anti-TCF7L2 0.2ml
Anti-Phospho-TLK1 (Ser695)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-LKB1(Ser334) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶 規(guī)格 0.1ml
NT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒英文名稱:Rat amyloid beta peptide 1-40,Aβ1-40 ELISA Kit特價(jià)促銷
大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒英文名稱:Rat amyloid beta peptide 1-42,Aβ1-42 ELISA Kit特價(jià)促銷
capsid protein 英文名稱: 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白 0.2ml
Anti-phospho-FOXO4 (Ser197) 磷酸化叉頭蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MAdCAM-1(Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-FOXO4 (Ser262) 磷酸化叉頭蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
C/EBP Delta(Human CCAAT/enhancer binding protein deta) ELISA Kit 人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ 96T
SPOCK1 英文名稱: 蛋白聚糖1 0.2ml
CDK11 英文名稱: 周期素依賴性激酶11 0.2ml
Anti-phospho-c-Jun (Ser63) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Lumbrokinase 蚯蚓纖溶酶(蚓激酶抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-SLAMF9 CD2F-10Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 規(guī)格 0.1ml
CST7 Kit Human 人 Cystatin F / CST7 ELISA配對(duì) ELISA
Thymidylate synthase 英文名稱: 胸苷酸合成酶 0.1ml
CK17 英文名稱: 細(xì)胞角蛋白17 0.1ml
Anti-NT 神經(jīng)降壓素Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit 人α烯醇化酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NF2/merlin 2型神經(jīng)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-2 白介素2(人) 規(guī)格 0.2ml
ARPA/Rib-P(Human anti-ribosomal P protein antibody) ELISA Kit 人抗核糖體P蛋白 96T
Phospho-p63 (Ser395) 英文名稱: 磷酸化P63抑制基因 0.1ml