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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR3915
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-07
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR3915 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
野牛奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Ostertagia bisonis | LZR3915 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
鏈霉菌屬SIGLEC3 (Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces sp.
枯草芽孢桿菌CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
侵蝕侏儒囊菌MIP-5 (Macrophage Inflammatory Protein 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Nannocystis exedens
釀酒酵母CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
地衣芽孢桿菌Cx (Connexin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus licheniformis
枯草芽孢桿菌MIP-3β/ELC/CCL19 (Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
蜂房類芽孢桿菌C-P (C-Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Paenibacillus alvei
紅法夫酵母SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extracellular) ELISA Kit拉丁屬名: Phaffia rhodozyma
CitricoccusGDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Citricoccus zhacaiensis
根瘤菌屬PRELP (Proline Arginine Rich End Leucine Rich Repeat Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobium alkalisoli
沙針擬盤多毛孢NOX5 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 5) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis osyridis
傘菌假單胞菌GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas agarici
釀酒酵母CLA (Collagen Autoantibody) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
枯草芽孢桿菌枯草亞種NA/NE (Noradrenaline/Norepinephrine) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
炭黑曲霉CDK2 (Cyclin Dependent Kinase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
野牛奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Apolipoprotein E 英文名稱： 載脂蛋白E 0.1ml
Anti-phospho-Bim(Ser69) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化細(xì)胞死亡調(diào)解子IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-3(Mouse Interleukin 3) ELISA Kit 小鼠白介素3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CCP/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗瓜氨酸環(huán)肽IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EDG3 內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3 規(guī)格 0.2ml
I CTP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T
MRP8+MRP14 英文名稱： 多藥耐藥相關(guān)蛋白8/9/14 0.2ml
C9ORF43 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框43 0.2ml
Anti-OAT-3 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-OAT-1/SLC22A6 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IFI78/MX1 干擾素誘導(dǎo)蛋白P78 規(guī)格 0.1ml
GP-MM(Mouse Glycogen phosphorylase MM)ELISA Kit 小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM 96T
PCDHA8 英文名稱： 原鈣粘附蛋白α8 0.2ml
beta-Amyloid(25-35) 英文名稱： β淀粉樣肽(25-35) 0.1ml
Anti-Tie2 生成素受體2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Stra8 視黃酸激活基因8Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
LDL-IC ELISA Kit 大鼠免疫復(fù)合物 96T
NCKAP1L 英文名稱： 造血蛋白1 0.2ml
CFDP1 英文名稱： 顱面部發(fā)育蛋白1 0.2ml
Anti-MMP-15 基質(zhì)金屬蛋白酶-15Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PWM(Human poke* mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MBP 髓鞘堿性蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KAT4 細(xì)胞周期基因1蛋白 規(guī)格 0.1ml
CYT Ab(Human Cysticercosis antybody) ELISA Kit 人囊蟲病 96T
PHKG2 英文名稱： 磷酸化酶激酶γ2 0.2ml
