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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3952
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3952 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
青霉通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Penicillium spp. | LZR3952 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
貴州綠僵菌MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) ELISA Kit 用途: 生物防治
粘蓋牛肝菌*MMP-7 (Matrix Metalloproteinase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Suillus bovinus
雞傷寒沙門氏菌PROS (Protein S) ELISA Kit拉丁屬名: gallinarum
大腸埃希氏菌ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
柿盤多毛孢PUMA (P53 Upregulated Modulator of Apoptosis) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
AlbidiferaxTP53 (Tumor Protein p53) ELISA Kit拉丁屬名: Albidiferax sp.
南方鹽單胞菌RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed And Secreted) ELISA Kit 拉丁屬名: Halomonas meridiana
維羅納假單胞菌RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
大腸埃希氏菌CgB (Chromogranin B) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
松口蘑FTL (Ferritin, Light Polypeptide) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
枯草芽孢桿菌MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
POMC (Pro-Opiomelanocortin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
紫紅曲霉ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Monascus purpureus
植物乳桿菌植物亞種INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
高溫放線菌科未定屬GSTpi (Glutathione S Transferases Pi) ELISA Kit拉丁屬名: Thermoactinomycetaceae sp.
青霉通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商MMP-1(Mous ematrix metalloproteinases-1) 基質(zhì)金屬蛋白酶-1(小鼠抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD33/Siglec-3 CD33Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PADI4 相關(guān)基因 規(guī)格 0.2ml
CLEC6A Kit Mouse 小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 ELISA配對(duì) ELISA
TPP1 英文名稱： 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制基因1蛋白 0.2ml
CD1A 英文名稱： T淋巴細(xì)胞CD1 0.1ml
Anti-CD33/Siglec-3 CD33Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CAB39L 英文名稱： 鈣結(jié)合蛋白樣39 0.2ml
Anti-LH 促黃體生成素單克隆Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NR2C/NMDAR2C 谷氨酸受體2C(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGFBP4/IBP4 樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4 規(guī)格 0.1ml
GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽 96T
phospho-PTPRA(Tyr798) 英文名稱： 磷酸化酪酸磷酸酶α 0.1ml
Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原癌蛋白CBL2 規(guī)格 0.1ml
單組分AEC染色試劑盒 200片/20ml 需用甘油封固,紅色
VAPB 英文名稱： 囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B 0.2ml
DNA polymerase mu 英文名稱： DNA聚合酶μ/DNA pol μ 0.2ml
Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ETV3L 英文名稱： ETV3L蛋白 0.2ml
Chemokine Receptor D6 英文名稱： 趨化因子受體D6 0.1ml
Anti-HBeAg(1) 人e抗原(1)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TNFRSF18 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)壞死因子受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈 96T
RAD50 英文名稱： DNA修復(fù)蛋白R(shí)ad50 0.2ml
