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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3976
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3976 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬腺病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒供應(yīng)商 | Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus) | LZR3976 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
牛布魯氏菌病間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) ELISA Kit 規(guī)格: 96孔板*2塊板
褐色馬勃Salusin α (Salusin Alpha) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
戊糖乳桿菌ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
雅致小克銀漢STAT2 (Signal Transducer and Activator of Transcription 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Cunninghamella elegans
雙鞘不黏柄菌Methylase ELISA Kit拉丁屬名: Asticcacaulis biprosthecium
擬莖點(diǎn)霉CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 拉丁屬名: Diaporthe sp.
巨型艾美耳球蟲(chóng)SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁屬名: maxima
亞熱帶細(xì)小鏈孢菌α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit
拉丁屬名: Catenulispora subtropica
金黃色葡萄球菌CX3CR1 (Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Staphylococcus aureus
溜曲霉C/EBPβ (CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus tamarii
臺(tái)灣根霉S100A11 (S100 Calcium Binding Protein A11) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus formosensis
肉糜 鵝源性成分（定性）FG (Fibrinogen) ELISA Kit拉丁屬名: 肉糜 鵝源性成分（定性）
淡紫擬青霉MUC7 (Mucin 7) ELISA Kit用途: 用作生物防治研究
皮落青霉CAMK2α (Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium crustosum
杏鮑菇EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豬腺病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒供應(yīng)商Claudin 22 英文名稱： 緊密連接蛋白22 0.1ml
Anti-Connexin-32 間隙連接蛋白32Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病毒16型E7蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CXCR7/RDC1 細(xì)胞表面趨化因子受體7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX8 配對(duì)盒基因8 規(guī)格 0.1ml
SERPINF2 Kit Mouse 小鼠 SerpinF2 ELISA配對(duì) ELISA
TNFRSF19 英文名稱： 壞死因子配體超家族成員19 0.1ml
CADPS2 英文名稱： 鈣依賴分泌激活蛋白2/的相關(guān)蛋白 0.2ml
Anti-Leptin 瘦素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit 人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3GMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受體-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HOXB5 同源盒蛋白HOXB5 規(guī)格 0.1ml
IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 96T
Phospho-PLC beta3 (Ser1105) 英文名稱： 磷酸化磷酯酶Cβ3 0.1ml
Rhesus antibody Rh PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38 規(guī)格 0.1ml
MEP1A Kit Mouse 小鼠 MEP1A ELISA配對(duì) ELISA
TPOR 英文名稱： 血小板生成素受體 0.1ml
CHL1 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL 0.2ml
Anti-CD34 CD34Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
豬高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Methemoglobin,MHB ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
豬睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Testoterone,T ELISA Kit進(jìn)口/分裝
Chondrocalcin 英文名稱： Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素 0.1ml
Anti-GLUR3/GRIA 3 谷氨酸受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
SK(Human Streptokinase) ELISA Kit 人鏈激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NGF-beta 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-βMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-17B 白介素-17B 規(guī)格 0.1ml
IL-2sR Beta ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受體β鏈 96T
phospho-PTPN7 (Ser93) 英文名稱： 磷酸化非受體型蛋白酪酸磷酸酶7 0.1ml
