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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR3982
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3982 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Porcine Endogenous Retrovirus(PERV) Provirus | LZR3982 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
大腸埃希菌M-AChR M2 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M2) ELISA Kit拉丁屬名: coli
淺黃鏈霉菌VDR (Vitamin D Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces flaveolus
蕈青霉IL-2Rα (Interleukin 2 Receptor Alpha) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium paxilli
寄生曲霉DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus parasiticus
球孢白僵菌RIPK2 (Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究
Achromobacter piechaudiiPEX2 (Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit 用途: 益生菌
深綠木霉FOXC1 (Forkhead Box Protein C1) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma atroviride
棒桿菌TAGLN (Transgelin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
木腐裂褶病菌Hepc (Hepcidin) ELISA Kit 拉丁屬名: Schizophyllum commune Fr.
毛韌革菌ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Stereum hirsutum
邊緣假單胞菌防風(fēng)致種PHLDA2 (Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas marginalis pv. pastinacae
CompostimonasTEF (Thyrotroph Embryonic Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Compostimonas suwonensis
球孢白僵菌GPR120 (G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit用途: 生物防治
香菇(神農(nóng)5號)Grb10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
黃柄曲霉OFQ/N (Orphanin FQ/Nociceptin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CD81 英文名稱: CD81 0.1ml
Anti-Phospho-cdc25C (Thr48) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25CMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Metronidazole/KLH 甲硝唑偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 10mg
Anti-Phospho-CEBP beta (Thr235) 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh OCIAD1 免疫反應(yīng)抗原 規(guī)格 0.2ml
poly-L-lysine-Prep Slides 多聚賴酸磨砂玻片(片載玻片) 50片
TMEM176A 英文名稱: 跨膜蛋白176A 0.1ml
Calcitonin receptor 英文名稱: 降鈣素受體 0.1ml
Anti-Phospho-eNOS (Ser1177) 磷酸化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
ASCA(Human Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody) ELISA Kit 人抗釀酒酵母Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-peripherin 外周蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Histone H3-like protein 組蛋白H3樣 規(guī)格 0.2ml
MHC III /AgB III /H-1 III ELISA Kit 大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 96T
phospho-PIK3 gamma (Thr1024) 英文名稱: 磷酸化磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ 0.1ml
Anti-TFR/CD71/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)鐵蛋白受體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAPKAPK2(Thr334) 磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2 規(guī)格 0.1ml
neurofasciu-155 神經(jīng)束蛋白-155Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人血漿抗凝蛋白S(PS) ELISA試劑盒 英文名稱:Human plasma anticoagulant protein S,PS ELISA Kit特價(jià)促銷
人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Plasma fibronectin,pFN ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人血凝素(HA)ELISA試劑盒英文名稱:Human hemagglutinin,HA ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒英文名稱:human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,GSK2 ISA KIT特價(jià)促銷
CHRDL2 英文名稱: 新因子1 0.1ml
Anti-PIBF 孕激素誘導(dǎo)阻斷因子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD303/BDCA-2 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員CMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IFRD1 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1(神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白PC4) 規(guī)格 0.2ml
APF(Human anti-perinuclear factor) ELISA Kit 人抗核周因子 96T
PLSCR3 英文名稱: 磷脂爬行酶3 0.2ml