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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4001
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-18
- 更新日期： 2025-02-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4001 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雷氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Providencia rettgeri | LZR4001 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大腸埃希菌αHBDH (α-Hydroxybutyrate Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: coli
谷氨酸棒桿菌PRKG1 (Protein Kinase, cGMP Dependent Type I) ELISA Kit用途: 產(chǎn)賴氨酸菌株
鏈霉菌IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 用途: 分類 研究
平臍儒孢菌F13 (Coagulation Factor ⅩⅢ) ELISA Kit用途: 研究
硬水黃桿菌δSIP-α (Delta Sleep Inducing Peptide α) ELISA Kit拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
卷曲鏈霉菌NRP1 (Neuropilin 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
膠孢STAT5A (Signal Transducer and Activator of Transcription 5A) ELISA Kit 拉丁屬名: Colletotrichum gloeosporioides
SandarakinorhabdusBCDF (B-Cell Differentiation Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Sandarakinorhabdus sp.
毛木耳MASP (Mannan Binding Lectin Associated Serine Protease) ELISA Kit拉丁屬名: Auricularia polytricha
枯草芽孢桿菌HYOU1 (Hypoxia Up Regulated 1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
馬賽菌MLZE (Melanoma Derived Leucine Zipper Extra Nuclear Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Massilia namucuonensis
大腸埃希氏菌PDGF (Platelet-Derived Growth Factor) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
CaN (Calcineurin) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
釀酒酵母CPR (Cytochrome P450 Reductase) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
塔賓曲霉CDKN3 (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
雷氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒 AKT1 英文名稱： 蛋白激酶B 0.1ml
Anti-Bax protein/FITC 熒光素標(biāo)記 Bax 蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
F VIII -Ag(Mouse coagulation factor VIII related antigen) ELISA Kit 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD34/PE 熒光素PE標(biāo)記CD34(細(xì)胞表面的唾液粘蛋白)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DUSP1/MKP1 原活化蛋白激酶磷酸酶-1 規(guī)格 0.1ml
COX IgG II 柯薩奇病毒 IgG Ⅱ(間接法二步法)
MKS1 英文名稱： 梅克爾-格魯伯綜合征相關(guān)蛋白 0.2ml
Camk1g 英文名稱： 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG 0.1ml
Anti-NQO1 醌氧化還原酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
anti-RV IgM(Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM) ELISA Kit 人IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RKIP Raf激酶抑制蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HEATR7B2 熱休克蛋白受體家族蛋白7B2 規(guī)格 0.2ml
eNOS-3(Human Alpha1-Acid glycoprotein) ELISA Kit 人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 96T
PALB2 英文名稱： 癌易感基因相關(guān)蛋白2 0.1ml
CD155/PVR 英文名稱： 病毒受體 0.1ml
Anti-Phospho-Dab1 (Ser491) 磷酸化Disabled 1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
IL-3 大鼠白介素-3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-TNFRSF12A 壞死因子配體超家族成員12AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEK2 中心體相關(guān)蛋白激酶Nek2 規(guī)格 0.2ml
Human glycosylated serum protein,GSP ELISA Kit 人糖化蛋白 96T
TMEM59L 英文名稱： 跨膜蛋白59樣蛋白 0.2ml
CIDEB 英文名稱： CIDEB 0.2ml
Anti-Nonylphenol 任基酚Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2mg
26S PSM(Human 26S proteasome) ELISA Kit 人26S蛋白酶體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-NPM 核仁磷酸蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGSF5 免疫球蛋白超家族成員5 規(guī)格 0.2ml
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素釋放激素 96T
phospho-PIK3R1(Tyr467) 英文名稱： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶 0.1ml
