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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR4031
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR4031
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Rickettsia mooseri

LZR4031


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

米曲霉F9 (Coagulation Factor Ⅸ) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  oryzae

殼梭孢屬(都不提供)PAEP (Progestagen-Associated Endometrial Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Fusicoccum sp.

枯草芽孢桿菌SCG2 (Secretogranin II) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

鉛黃腸球菌PCP (Procollagen C Peptidase)ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

粉紫小菇BPI (Bactericidal/Permeability Increasing Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

假絲酵母屬RARα (Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Candida  sp.

青霉C3b (Complement Fragment 3b) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

香菇*iPLA2 (Phospholipidase A2, Calcium Independent) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinus edodes (Berkeley) Singer

雷夫松氏菌NMP-22 (Nuclear Matrix Protein 22) ELISA Kit拉丁屬名: Leifsonia sp.

蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

釀酒酵母THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

枯草芽孢桿菌FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

遠(yuǎn)青鏈霉菌CNP (C-type Natriuretic Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces azureus

卷枝毛霉卷枝變型HSPβ6/HSP-20 (Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor circinelloides f. circinelloides

日本根霉TCF20 (Transcription Factor 20) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus  japonicus
莫氏立克次體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書FECH 英文名稱: 鐵螯合酶 0.1ml

/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG Anti-Camk1g 0.1ml

Anti-TWIST protein/FITC 熒光素標(biāo)記TWIST轉(zhuǎn)錄因子蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-HSL (Ser959+960) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶 規(guī)格 0.1ml

CBX3/HP1 gamma homolog(Chromobox homolog 3) 染色盒同源物3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat Erythropoietin,EPO ELISA Kit進(jìn)口/原裝

大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Erythropoietin receptor,EPOR ELISA Kit特價(jià)促銷

CARD4 英文名稱: 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白4 0.2ml

Anti-phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin BMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

KGF 大鼠角蛋白生長(zhǎng)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-ENPP3/CD203c ENPP3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MURF2 肌肉特異性環(huán)指蛋白2 規(guī)格 0.2ml

f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白 96T

SLCO3A1 英文名稱: 可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3A1 0.2ml

Anti-BCHE 丁酰膽堿酯酶單克隆Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

EDG1 英文名稱: 內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1 0.1ml

CREB結(jié)合蛋白 Anti-CBP 0.1ml

Anti-ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H3 (Ser28) 磷酸化組蛋白H3 規(guī)格 0.1ml

VEGF(Vascular endothelial growth factor) 內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

人前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒 英文名稱:Human prostacycline,PGI ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)

CKAP4 英文名稱: 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4 0.2ml

Anti-LRIG1 LRIG1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶CMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh IL5RA/CD125 白介素-5受體α鏈IL-5Rα 規(guī)格 0.1ml

PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇IgG/IgM 96T

Prostaglandin dehydrogenase 1 英文名稱: 素脫氫酶1 0.1ml

 


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