- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4064
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4064 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
肉孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Sarcocystis spp. | LZR4064 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
病毒間接ELISA抗體檢測(cè)試劑盒FGγ (Fibrinogen Gamma) ELISA Kit 規(guī)格: 5*96孔板
細(xì)麗擬盤多毛孢TDP43 (Tar DNA Binding Protein 43KDa )ELISA Kit 拉丁屬名: Pestalotiopsis gracilis
釀酒酵母FSHR (Follicle Stimulating Hormone Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
花楸盤多毛孢NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
果生鏈核盤菌HELIX-Ⅱ(Type Ⅱ Collagen Helical Peptide) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
厄氏菌MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) ELISA Kit拉丁屬名: Oerskovia sp.
核盤菌EAR12 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 12) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
枯草芽孢桿菌HNRPU (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
金黃色葡萄球菌OTR (Oxytocin Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: aureus
伯頓生絲畢赤酵母Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Hyphopichia burtonii
平菇ADRA1A (Adrenergic Receptor alpha-1A ) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
香菇ApoA2 (Apolipoprotein A2) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinula edodes
枯草芽孢桿菌PRDX5 (Peroxiredoxin 5) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
毛栓孔菌CTNNβ1 (Catenin, Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Trametes hirsuta
芽胞桿菌PGD2-MOX (Prostaglandin D2-Methoxime) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
肉孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商HER2 receptor(NT)(erbB-2 isoform 2 receptor N-Terminus) c-erbB-2受體抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-4EBP1(Ser64) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Cofilin(Ser3) 磷酸化絲切蛋白 規(guī)格 0.1ml
羊抗人IgG、IgM、IgA-純化 1mg/10mg 國(guó)產(chǎn)
XKR1 英文名稱: 膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白XK 0.2ml
DOK6 英文名稱: 胞漿接頭蛋白Dok6 0.2ml
Anti-phospho-4EBP1(Ser64) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Caspase-9 英文名稱: 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6 0.1ml
Anti-IKB beta 核因子κB抑制蛋白βMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT 人白介素12Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GPR109A/HM74A G蛋白偶聯(lián)受體109AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Monoacylglycerol Lipase 單酰甘油脂肪酶 規(guī)格 0.2ml
UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人 96T
RSRC2 英文名稱: 蛋白 0.2ml
人抗鈣調(diào)素特異(CAM-ab)ELISA試劑盒英文名稱:Human anti-calmodulin specific antibody,CaM-ab ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人抗肝可溶性抗原(SLA)ELISA試劑盒英文名稱:Human Proteinase 3 Antibody,PR3Ab ELISA Kit特價(jià)促銷
人抗肝腎微粒體(LKM)ELISA試劑盒英文名稱:Human liver kidney microsome autoantibody,LKM ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人抗肝素PF4復(fù)合物/HIT(HIT)ELISA試劑盒英文名稱:Human heparin associated antibody,HIT ELISA Kit特價(jià)促銷
LDH(Lactate Dehydrogenase) 乳酸脫氫酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Hepatocyte 人肝細(xì)胞單克隆Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Cas (Tyr165) 磷酸化細(xì)胞凋亡敏感性基因 規(guī)格 0.1ml
CLCA4 英文名稱: 鈣激活氯離子通道4蛋白 0.2ml
Anti-Phospho-HSL (Ser660) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
HL(Human hepatic lipase) ELISA Kit 人肝脂酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Hrasls3/HREV107 HRAS樣抑制因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Maspin 基因 規(guī)格 0.1ml
MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶11 96T
RAB3GAP1 英文名稱: RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位1 0.2ml