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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4068
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4068 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
柯拉松血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商 | Schistosoma curassoni | LZR4068 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
新疆糖絲菌NTXI (Cross Linked N-telopeptide of Type I Collagen) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharothrix xinjiangensis
海綿假單胞菌FN (Fibronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas pachastrellae
鞘氨菌屬HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingobium aromaticiconvertens
喬治亞青霉PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium georgiense
強雄腐霉PROC (Protein C) ELISA Kit拉丁屬名: Pythium arrhenomanes
大彎桿菌NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Flectobacillus major
粉紅聚端孢VEGF-D (Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichothecium roseum
大腸埃希氏菌(大腸桿菌)PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
產(chǎn)黃青霉UGT2B4 (Uridine Dipho-sphate Glucuronosyltransferase 2 Family Polypeptide B4) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
Erythrobacter pelagi MIP-3β/ELC/CCL19 (Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit 拉丁屬名: Erythrobacter pelagi
季也蒙假絲酵母EPP (Erythrocyte Protoporphyrin) ELISA Kit拉丁屬名: Candida guilliermondii
橄欖色青霉PRI (Placental Ribonuclease Inhibitor) ELISA Kit用途: 飼料用酶的篩選
南方樹舌GH2 (Growth Hormone 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Ganoderma australe (Fr.) Pat
釀酒酵母VTN (Vitronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
紅淡紫灰鏈霉菌GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces rubrolavendulae
柯拉松血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商CD63/MLA1 溶酶體膜糖蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-A Raf(Ser299) 磷酸化A-Raf 規(guī)格 0.1ml
Ki67 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UBE2J2 英文名稱： 泛素蛋白連接酶J2 0.2ml
CHST12 英文名稱： 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶12 0.1ml
Anti-Bag1/RAP46 抑凋亡基因bag1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Catalase 英文名稱： 酶 0.1ml
Anti-phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 磷酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EPOR(Human Erythropoietin receptor) ELISA Kit 人紅細(xì)胞生成素受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-MARCO 巨噬細(xì)胞清道夫受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KIAA1522 KIAA1522蛋白 規(guī)格 0.2ml
Cortisol ELISA Kit 大鼠皮質(zhì)醇 96T
PPAR gamma 2 英文名稱： 過氧化酶活化增生受體γ2 0.2ml
Anti-TIEG1/KLF10/FITC 熒光素標(biāo)記TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8 規(guī)格 0.1ml
AVPR2(arginine vasopressin receptor 2) 精氨酸加壓素受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒英文名稱：Rat high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit進(jìn)口/分裝
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA Kit特價促銷
大鼠成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒英文名稱：Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA試劑盒英文名稱：Rat very late appearing antigen,VLA ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CLDND2 英文名稱： 膜蛋白CLDND2 0.2ml
Anti-FPRL1 脂氧素受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
UPAR 大鼠凝血酶受體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-EGF 表皮生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MYL9 肌球蛋白輕鏈9 規(guī)格 0.1ml
C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit 人補體片斷4d 96T
SOX17 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子SOX17 0.1ml
