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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4083
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-02-11
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4083 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
志賀氏菌屬通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Shigella spp. | LZR4083 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
中度嗜熱雙突柄菌CEP110 (Centrosomal Protein 110kDa) ELISA Kit 拉丁屬名: Amphiplicatus metriothermophilus
刺葡萄孢霉屬GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
管毛殼NCAD (Neural Cadherin) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium cuniculorum
非洲黑蛋巢DLK-1 (Delta Like 1 Homolog) ELISA Kit拉丁屬名: Cyathus africanus
紫荊生葉點(diǎn)霉菌SCF (Stem Cell Factor) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
香菇TR (Thrombin Receptor) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
子午線假單胞菌CALU (Calumenin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas meridiana
口腔支原體DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) ELISA Kit拉丁屬名: orale
長(zhǎng)野解支鏈淀粉芽孢桿菌SOD1 (Superoxide Dismutase 1, Soluble) ELISA Kit拉丁屬名: Pullulanibacillus naganoensis
扶桑本森頓酵母α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Bensingtonia yamatoana
釀酒酵母UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
鏈霉菌FETUA (Fetuin A) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces sp.
溫特曲霉原變種PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus wentii var. wentii
鍺栓孔菌TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes ochracea
香菇NFYC (Nuclear Transcription Factor Y Gamma) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
志賀氏菌屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1 規(guī)格 0.1ml
山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國(guó)Jackson公司分裝
VEGF-A 英文名稱： 內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A 0.1ml
DNA polymerase delta 英文名稱： DNA聚合酶γ 0.2ml
Anti-APOD 載脂蛋白DMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ERK4 英文名稱： 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶4 0.1ml
Smad 2/3 Anti-Smad2/3 0.1ml
CBLN1 英文名稱： 小腦肽1 0.2ml
Anti-GADD45 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-Brucella/Biotin 生物素標(biāo)記抗布魯氏菌IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-GRM4/mGluR4/FITC 熒光素標(biāo)記促代謝型谷氨酸受體4IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ChRM3/Acetylcholine receptor(M3) 毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3 規(guī)格 0.1ml
Angiotensin II receptor(Ang II ) 緊張素Ⅱ受體(抗原) 0.5mg
rat IgA 英文名稱： 大鼠血清型IgA 0.2ml
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 英文名稱：Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit特價(jià)促銷
人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit進(jìn)口/原裝
人免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒英文名稱：Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
人免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Immunoglobulin G，IgG ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
PSAP/PAP peptide 酸性磷酸酶抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-Bad 相關(guān)死亡促進(jìn)因子BadMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
CLN5 英文名稱： 神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5 0.2ml
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human Leishimaria antibody ELISA Kit 人利什曼原蟲(chóng)Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLF13/RFLAT-1 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LAPTM4A 溶酶體相關(guān)膜蛋白4α 規(guī)格 0.2ml
P-CK(Pig pan-cytokeratin) ELISA Kit 豬廣譜細(xì)胞角蛋白 96T
PRR7 英文名稱： 突觸富含脯酸膜蛋白7 0.2ml
