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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4109
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-19
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4109 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
念珠狀鏈桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Streptobacillus moniliformis | LZR4109 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
異配囊接霉PDIA5 (Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor heterogamus
嗜果刀孢FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: tigmina carpophila
扣囊復(fù)膜孢酵母EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera
巨大芽孢桿菌CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus megaterium
黃褐牛肝菌GNβ1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Boletus subsplendidus W.F. Chiu
銅綠假單胞菌CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
狹旋毛殼AP 17 (Apelin 17) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium angustispirale
樟疫霉PKD1 (Protein Kinase D1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
環(huán)形凸臍蠕孢GAD2 (Glutamate Decarboxylase 2) ELISA Kit 用途: 研究
人纖維單胞菌CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型GFAP (Glial Fibrillary Acidic Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: perfringens Type C
釀酒酵母ACAT2 (Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
鹽反硝化枝芽孢桿菌 IGFBP-2 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Virgibacillus halodenitrificans
大腸桿菌SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 用途: 獲得來(lái)源于Thermus菌屬的耐高溫酶類用于科學(xué)研究及功能檢測(cè)
雷丸*BCL2L1/BCL-X (Bcl-2 Like Protein 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
念珠狀鏈桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 AADACL4 英文名稱： 芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4 0.2ml
Anti-A/H1N1-M2 Human/Gold 膠體金標(biāo)記兔抗人A型病毒H1N1-M2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit 小鼠白介素7Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELOVL6 長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)酶長(zhǎng)ELOVL6 規(guī)格 0.2ml
phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 植物血凝素 96T
METTL11A 英文名稱： 甲基化樣蛋白11(N端) 0.1ml
CCDC138 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138 0.2ml
Anti-KLF5 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-Kinesin 5B (Ser272) 磷酸化Kinesin 5BMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LASS2 轉(zhuǎn)移抑制基因1 規(guī)格 0.2ml
CA(Human catecholamine) ELISA Kit 人兒茶酚胺 96T
P2Y8 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y8 0.2ml
phospho-Desmin (Thr16) 英文名稱： 磷酸化結(jié)蛋白 0.1ml
Anti-ACEI 緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ESYT1 英文名稱： 延伸突觸蛋白1 0.2ml
軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-B Anti-Nogo-B 0.2ml
Anti-Phospho-SirT1 (Ser47) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-P53(Thr18) 磷酸化抑制基因P53 規(guī)格 0.1ml
Bax peptide Bax(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
CNN2 英文名稱： 平滑肌鈣調(diào)蛋白CNN2 0.2ml
Anti-IL-8/CXCL8 (mouse, rat) 白介素8 (小鼠，大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
LN 人層粘連蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CK II alpha/STK 屬絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NT/NTS1/NTRH 神經(jīng)降壓素 規(guī)格 0.1ml
Plasmid Minipreparation Kit 質(zhì)粒小提試劑盒 100次(100個(gè)硅膠柱和試劑)
RNF125 英文名稱： 環(huán)指蛋白125 0.2ml
