- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào):LZR4087
- 價(jià)格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-19
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號(hào) | LZR4087 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
中華根瘤菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Sinorhizobium spp. | LZR4087 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
慶笙紅球菌COL4 (Collagen Type IV) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus qingshengii
絲狀鏈霉菌NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces filamentosus
枯草芽孢桿菌LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
琉球曲霉Grb10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus luchuensis
松針散斑殼MN (Metanephrine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
產(chǎn)黃青霉DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
ATCC 14025IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus avium
密黃紅菇VPI (Vasoactive Peptidase Inhibitors) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
輝光柄菇*Trx (Thioredoxin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
普通裂褶菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit用途: 資源真菌
多主殼菌PROZ (Protein Z) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鏈孢囊菌PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。
小孢根霉PIAS3 (Protein Inhibitor of Activated STAT3) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus
RudaeaPDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit拉丁屬名: Rudaea cellulosilytica
桑葉刺盤孢ABCA1(ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit拉丁屬名: Colletotrichum morifolium Hara
中華根瘤菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Methemoglobin,MHB ELISA Kit 特價(jià)促銷
小鼠睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Testoterone,T ELISA Kit進(jìn)口/分裝
規(guī)格:96T小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 進(jìn)口/原裝
小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
Caspase-10 人Caspase-10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DC-SIGN/CD209 細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Nesfatin-1/Nucb2 新的飽食分子蛋白 規(guī)格 0.2ml
CBP 英文名稱: CREB結(jié)合蛋白 0.1ml
Anti-Caspase-13/4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-CCL13/MCP-4 單核細(xì)胞趨化蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCDHA12 原鈣粘蛋白12 規(guī)格 0.2ml
ICAM3 Kit Human 人 CD50 / ICAM-3 ELISA配對(duì) ELISA
phospho-Tau protein(Ser199) 英文名稱: 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)
小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit特價(jià)促銷
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Methylase ELISA Kit 進(jìn)口/分裝
Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-Src(Tyr529) 磷酸化Src原癌基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格 0.3ml
CLPS 英文名稱: 胰輔脂酶 0.2ml
Anti-Egr-1 早期生長應(yīng)答蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Endostatin 小鼠內(nèi)皮抑素Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-ETK/BMX 非受體性蛋白酪氨酸激酶ETKMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MrpL28 線粒體核糖體蛋白L28 規(guī)格 0.1ml
SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人特異性β1糖蛋白 96T
phospho-Syntaxin 1a(Ser188) 英文名稱: 磷酸化突觸融合蛋白1 0.1ml