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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
中華根瘤菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR4087
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-19
  • 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR4087
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

中華根瘤菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Sinorhizobium spp.

LZR4087


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

慶笙紅球菌COL4 (Collagen Type IV) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus qingshengii

絲狀鏈霉菌NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces filamentosus

枯草芽孢桿菌LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

琉球曲霉Grb10 (Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus luchuensis

松針散斑殼MN (Metanephrine) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

產(chǎn)黃青霉DCLK1 (Doublecortin Like Kinase 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

ATCC 14025IL-12 p40 (Interleukin 12 p40) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus avium

密黃紅菇VPI (Vasoactive Peptidase Inhibitors) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

輝光柄菇*Trx (Thioredoxin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

普通裂褶菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit用途: 資源真菌

多主殼菌PROZ (Protein Z) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

鏈孢囊菌PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有活性。

小孢根霉PIAS3 (Protein Inhibitor of Activated STAT3) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizopus microsporus

RudaeaPDIA6 (Protein Disulfide Isomerase A6) ELISA Kit拉丁屬名: Rudaea cellulosilytica

桑葉刺盤孢ABCA1(ATP-binding cassette transporter A1) ELISA Kit拉丁屬名: Colletotrichum morifolium Hara
中華根瘤菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Methemoglobin,MHB ELISA Kit 特價(jià)促銷

小鼠睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Testoterone,T ELISA Kit進(jìn)口/分裝

規(guī)格:96T小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit 進(jìn)口/原裝

小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

Caspase-10 人Caspase-10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-DC-SIGN/CD209 細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nesfatin-1/Nucb2 新的飽食分子蛋白 規(guī)格 0.2ml

CBP 英文名稱: CREB結(jié)合蛋白 0.1ml

Anti-Caspase-13/4 半胱胺酸蛋白酶蛋白-13Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CCL13/MCP-4 單核細(xì)胞趨化蛋白4Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHA12 原鈣粘蛋白12 規(guī)格 0.2ml

ICAM3 Kit Human 人 CD50 / ICAM-3 ELISA配對(duì) ELISA

phospho-Tau protein(Ser199) 英文名稱: 磷酸化微管相關(guān)蛋白 0.1ml

小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit特價(jià)促銷

小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit 特價(jià)供應(yīng)

小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit特價(jià)促銷

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Methylase ELISA Kit  進(jìn)口/分裝

Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-phospho-Src(Tyr529) 磷酸化Src原癌基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗人IgM 規(guī)格 0.3ml

CLPS 英文名稱: 胰輔脂酶 0.2ml

Anti-Egr-1 早期生長應(yīng)答蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Mouse Endostatin 小鼠內(nèi)皮抑素Multi-class antibodies規(guī)格: 96T

Anti-ETK/BMX 非受體性蛋白酪氨酸激酶ETKMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MrpL28 線粒體核糖體蛋白L28 規(guī)格 0.1ml

SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人特異性β1糖蛋白 96T

phospho-Syntaxin 1a(Ser188) 英文名稱: 磷酸化突觸融合蛋白1 0.1ml

 


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