- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4111
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4111 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
犬鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Streptococcus canis | LZR4111 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
地星FGFR1 (Fibroblast Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 用途: 藥用
鹽沼鹽桿菌AMY1 (Amylase Alpha 1, Salivary) ELISA Kit拉丁屬名: Halobacterium salinarum
根桿菌屬MIA1 (Melanoma Inhibitory Activity Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhizobacter fulvus
樟疫霉*sIgA (Secretory Immunoglobulin A) ELISA Kit 拉丁屬名: Phytophthora cinnamomi
釀酒酵母CR (Calretinin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
pIB139PF4V1 (Platelet Factor 4 Variant 1) ELISA Kit 拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
龜裂鏈霉菌AST (Aspartate Aminotransferase) ELISA Kit用途: 益生菌
粗糙擬迷孔菌F13A1 (Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大囊接霉MF/MPF (Maturation Promoting Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Zygorhynchus macrocarpus
草菇MAPK (Mitogen Activated Protein Kinase) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
大豆慢生根瘤菌NUP37 (Nucleoporin 37kDa) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.2生長
鴨疫里氏桿菌MFG-E8 (Milk Fat Globule EGF Factor 8) ELISA Kit拉丁屬名: anatipestifer
鏈狀雙歧桿菌F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit拉丁屬名: Bifidobacterium catenulatum
略紫鏈霉菌MSMβ (Microseminoprotein Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces violarus
地衣生考克娃酵母TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit拉丁屬名: Kockovaella lichenicola
犬鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書ATXN3L 英文名稱: 小腦脊髓蛋白3 0.2ml
Anti-Cdc6/FITC 熒光素標記細胞分裂周期蛋白6IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
iFABP ELISA Kit 大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Acinus(phospho S1180)/FITC 熒光素標記腺泡磷酸化AcinusIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGFR3/CD333 成纖維細胞生長因子受體3 規(guī)格 0.1ml
omentin(Mouse omentin) ELISA Kit 小鼠網(wǎng)膜素 96T
MITF 英文名稱: MITF相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子 0.2ml
CCDC146 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白146 0.2ml
Anti-KIF17 驅(qū)動蛋白家族KIF17Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HO-2(Heme oxygenase 2) 血紅素氧合酶-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-AATF 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Thr239) 磷酸化原癌基因c-Jun 規(guī)格 0.1ml
兔抗雞IgG血清 0.5ml 國產(chǎn)
PAG608 英文名稱: 野生型P53誘導(dǎo)基因1 0.1ml
CHST5 英文名稱: 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶5 0.1ml
Anti-BACE/ASP2 β分泌酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EMC1 英文名稱: 腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1 0.1ml
鋅指脂蛋白-1b Anti-ZNF268 - middle 0.2ml
Anti-TTF-2/FITC 熒光素標記甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α 規(guī)格 0.1ml
Trk C 神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CNOT6 英文名稱: 細胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6 0.2ml
Anti-PEG3 PEG3蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
HCV-IgM(Human Hepatitis C virus IgM) ELISA Kit 人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Kv1.3/PCN3 離子通道蛋白Kv1.3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh laminin 層粘連蛋白 規(guī)格 0.1ml
BMPR-1A ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白受體1A 96T
Pumilio 1 英文名稱: PUM1蛋白 0.2ml