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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4117
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4117 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
變異鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Streptococcus mutans | LZR4117 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
茯苓*Anti-GM1 (Anti-Ganglioside M1 Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Poria cocos (Fr.) Wolf
枯草芽孢桿菌MT1M (Metallothionein 1M) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
螺卷毛殼ES (Endostatin) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium cochliodes
奇異球菌TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit 拉丁屬名: Deinococcus sp.
大豆慢生根瘤菌ODF (Osteoclast Differentiation Factor) ELISA Kit用途: 與大豆共生固氮,培養(yǎng)基pH4.4生長
釀酒酵母HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
地衣芽孢桿菌LDHB (Lactate Dehydrogenase B) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus licheniformis
血紅鞘氨單胞菌HJV/HFE2 (Hemojuvelin/Hemochromatosis Type 2) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas sanguinis
大腸埃希菌IGF1R (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: coli
德爾布有孢酵母MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Torulaspora delbrueckii
竹喙球菌EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor)ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
敏捷食酸菌FABP6 (Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal) ELISA Kit 拉丁屬名: Acidovorax facilis,72W
動性球菌RPA-70 (replication protein A) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
假單胞菌TRH (Thyrotropin Releasing Hormone) ELISA Kit用途: 微生物肥料
淺黃鏈霉菌CLS (Cardiolipin Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces flaveolus
變異鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 DLL3 英文名稱: Notch信號通路Delta樣配體3 0.2ml
Anti-COX7A2 細胞色素c氧化酶COX7A2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EYA4 英文名稱: EYA4蛋白 0.2ml
抗豬病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體 Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli] 0.2ml
Anti-Telomerase Binding Protein,P23/FITC 熒光素標記端粒酶結(jié)合蛋白P23IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-M-CSF Receptor(Tyr809) 磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體 規(guī)格 0.1ml
M2-PK ( pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CCDC158 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158 0.2ml
Anti-Ki-67 (Proliferation Marker) Ki-67單克隆Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重鏈Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷酸化P63抑制基因Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD17B1/HSD17 羥類固醇脫氫酶17β 規(guī)格 0.1ml
EBMZ(Human epidermal basement membrane zone) ELISA Kit 人抗表皮細胞基底膜 96T
PRRSV M protein 英文名稱: 豬藍耳病病毒M蛋白 1ml
DACT3 英文名稱: Dapper3蛋白 0.2ml
膜粘連蛋白 Ⅲ Anti-Annexin Ⅲ 0.1ml
Anti-ZO-1/FITC 熒光素標記胞質(zhì)緊密粘連蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK5( Ser731+Thr733) 磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5 規(guī)格 0.1ml
DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羥化酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit進口/分裝
大鼠CD44分子(CD44)ELISA試劑盒 英文名稱:Rat cluster Of differentiation,CD44 ELISA Kit特價供應(yīng)
CNTD 英文名稱: 細胞周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1 0.2ml
Anti-Phospho-ELk1 (Ser383) 磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Substance P 大鼠P物質(zhì)Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-VEGFR3 表皮生長因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MYL3/Myosin light chain 3 肌球蛋白輕鏈3 規(guī)格 0.2ml
HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit 人類白細胞抗原G 96T
ST18 英文名稱: 抑制蛋白18 0.2ml