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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
鏈球菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR4123
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR4123
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

鏈球菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Streptococcus spp.

LZR4123

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

枯斑擬盤多毛孢Sheep IFN-γ (Interferon Gamma) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

野油菜黃單胞菌Sheep IL-2 (Interleukin 2) ELISA Kit拉丁屬名: Xanthomonas campestris

柯奈尼亞小單孢菌Sheep IL-1β (Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Micromonospora chokoriensis

黃桿菌Sheep CSTA (Cystatin A)  ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium  urumqiense

膝形假單胞菌Sheep IL-12 (Interleukin 12) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

乳酸片球菌Sheep BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Pediococcus acidilactici

產(chǎn)酸酸桿菌Sheep IL-2R (Interleukin 2 Receptor) ELISA Kit 拉丁屬名: Propionibacterium acidipropionici

 Trichosporon oleaginosusSheep OPG (Osteoprotegerin) ELISA Kit 拉丁屬名:  Trichosporon oleaginosus

白淺灰鏈霉菌Sheep IL-6 (Interleukin 6) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces albogriseolus

水嗜冷桿菌Sheep IL-18 (Interleukin 18) ELISA Kit拉丁屬名: Psychrobacter aquaticus

蘇云金芽胞桿菌Sheep CKLFSF5 (Chemokine Like Factor Superfamily 5) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  thuringiensis

大腸埃希氏菌Sheep TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia  coli

腫痂鏈霉菌Sheep AP 13 (Apelin 13) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces turgidiscabies

鮑氏志賀氏菌Sheep DCX (Doublecortin) ELISA Kit 拉丁屬名: Shigella boydii

香菇Sheep CK-HMW (Cytokeratin High Molecular Weight) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
鏈球菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Rhesus antibody Rh phospho-ATG16A(Ser287) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白16A 規(guī)格 0.1ml

山羊SP(AP)試劑盒 140片 進(jìn)口原料

UAP56 英文名稱: ATP-依賴的RNA解旋酶p47 0.1ml

DNA Ligase 1 英文名稱: DNA連接酶1 0.1ml

Anti-phospho-Androgen Receptor (Ser580) 磷酸化雄激素受體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

EDIL3 英文名稱: 表皮生長因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3 0.2ml

嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177 Anti-CD177/NB1 0.1ml

CCDC28A 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A 0.2ml

Anti-MKK3 原活化蛋白激酶MKK3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-phospho-p53BP1(Ser25/29) 磷酸化p53結(jié)合蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HSJ2/DNAJB6 熱休克蛋白J2 規(guī)格 0.2ml

C*(Mouse Complement fragment *)ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體片斷* 96T

PNCK 英文名稱: 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶1β/CaMKIβ 0.2ml

人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒英文名稱:Human deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit特價供應(yīng)

人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱:Human deoxyribonuclease Ⅰ,DNase-Ⅰ ELISA Kit特價供應(yīng)

人脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒英文名稱:Human Deoxypyridinoline crosslinks,DPD ELISA Kit特價供應(yīng)

人脫氧尿三磷酸(DUTP)ELISA試劑盒 英文名稱:Human deoxyuridinetriphate,DUTP ELISA Kit進(jìn)口/原裝

PAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-ATG7 自噬相關(guān)蛋白7Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-AP2M1 (Thr156) 磷酸化接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1 規(guī)格 0.1ml

CO4A2 英文名稱: 膠原蛋白4a2亞基 0.2ml

Anti-LIF 抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

CR(Human Calretinin) ELISA Kit 人鈣結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163) 磷酸化髓樣細(xì)胞-1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh JAM1 連接粘附分子1 規(guī)格 0.1ml

BTC ELISA Kit 大鼠β細(xì)胞素 96T

PPHLN1 英文名稱: 脈周蛋白1(抗原蛋白Ga50) 0.2ml

 


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