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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4127
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4127 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
乳房鏈球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū) | Streptococcus uberis | LZR4127 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
芽孢桿菌屬Sheep IL-35 (Interleukin 35) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus
大腸埃希氏桿菌Sheep UBE2C (Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
Sheep GC (Glucagon) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
平菇Sheep AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit用途: 食用、藥用
綠膿桿菌Sheep GCK (Glucokinase) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas aeruginosa
假單胞菌屬Sheep COL15 (Collagen Type XV) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas sp
猴頭菇Sheep PTGS2/COX-2 (Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Hericium erinaceus
班戈錯(cuò)湖嗜鹽堿紅菌Sheep FcεR I (Receptor I for the Fc Fragment of IgE) ELISA Kit拉丁屬名: Natronorubrum bangense
新疆鹽地桿菌Sheep PCDHβ16 (Protocadherin Beta 16) ELISA Kit 拉丁屬名: Salinibacterium xinjiangense
楊奇青霉Sheep TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium janczwskii
長(zhǎng)雙歧桿菌*亞種Sheep bTC (Betacellulin) ELISA Kit 拉丁屬名: Bifidobacterium infantis reuter
鏈格孢Sheep SOD2 (Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
金黃色葡萄球菌RN4220Sheep BRAK/CXCL14 (Breast and Kidney Expressed Chemokine) ELISA Kit拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp
芽孢桿菌屬Sheep PLAP/ALPP (Placental Alkaline Phosphatase) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus sp.
鹽生鹽古桿菌Sheep I-TAC (Interferon Inducible T-cell Alpha Chemoattractant) ELISA Kit拉丁屬名: Halobacterium halobium
乳房鏈球菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Rhesus antibody Rh phospho-Dnmt1(Ser732) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1 規(guī)格 0.1ml
ECL化學(xué)發(fā)光顯色液(A和B各50ml) 套
ZAR1 英文名稱(chēng)： 受精卵抑制蛋白1 0.2ml
phospho-Dishevelled 2 (Ser143) 英文名稱(chēng)： 磷酸化蓬亂蛋白2 0.1ml
CA10 Carbonic Anhydrase X / CA10 鼠單抗 (PE) Human
DUSP4 英文名稱(chēng)： 原活化蛋白激酶磷酸酶-2 0.1ml
自噬相關(guān)蛋白7 Anti-ATG7 0.1ml
CCDC37 英文名稱(chēng)： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37 0.2ml
Anti-FoxP3 叉頭蛋白P3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Anti-GM-CSFR Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體αIgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-P14ARF/FITC 熒光素標(biāo)記基因p14IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh BEX4 腦表達(dá)X連鎖蛋白4 規(guī)格 0.2ml
ADRA2 peptide 能受體2抗原 0.5mg
SCHAD 英文名稱(chēng)： 短鏈L-3羥烷基輔酶A脫氫酶 0.2ml
Dlx1 英文名稱(chēng)： 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1 0.2ml
Anti-Apaf-1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(N端)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Exportin 5 英文名稱(chēng)： 核輸出蛋白5 0.2ml
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α Anti-CCL20/MIP3αMacrophage inflammatory ptotein 3 alpha 0.1ml
Anti-VAMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡相關(guān)膜蛋白1IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-HER4 (Tyr984) 磷酸化HER4 規(guī)格 0.1ml
CD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Collagen alpha-1(II) chain 英文名稱(chēng)： Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素 0.1ml
Anti-GPNMB/Osteoactivin GPNMBMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
GM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-GRO Alpha/GRO-1 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因-1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMS19 DNA修復(fù)甲基磺酸敏感性基因19 規(guī)格 0.2ml
Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪酸激酶3 96T
RING2 英文名稱(chēng)： 環(huán)指蛋白2 0.2ml
