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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4131
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4131 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
無齒類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Strongyloides edentatus | LZR4131 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
膠紅酵母Sheep PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula mucilaginosa
猜也蓬小單孢菌Sheep FGF4 (Fibroblast Growth Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Micromonospora chaiyaphumensis
木耳Sheep AFA (Anti-Filaggrin Antibody) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
絲核菌屬Sheep MFI2 (Melanotransferrin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
虎皮香菇，漏斗香菇Sheep TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
煙曲霉Sheep α-SMA (α-Smooth muscle actin) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus fumigatus
粉紅孢囊游動放線菌Sheep NUP155 (Nucleoporin 155kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes rutilosporangius
香菇*Sheep MAN1A1 (Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit拉丁屬名: Lentinus edodes (Berkeley) Singer
北京鳥氨酸微菌Sheep PDGFRα (Platelet Derived Growth Factor Receptor Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Ornithinimicrobium pekingense
科氏梭菌Sheep 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA Kit拉丁屬名: Clostridium kluyveri
*明亮發(fā)光桿菌Sheep PICK1 (Protein Interacting With Protein Kinase C, Alpha 1)ELISA Kit拉丁屬名: Photobacterium phosphoreum
異常漢遜酵母Sheep TP63 (Tumor Protein p63) ELISA Kit 拉丁屬名: Hansenula anomala
枯斑擬盤多毛孢Sheep α1BG (Alpha-1-B-Glycoprotein) ELISA Kit拉丁屬名: Pestalotiopsis funerea
飲料 檸檬黃、日落黃Sheep GAP43 (Growth Associated Protein 43) ELISA Kit 拉丁屬名: 飲料 檸檬黃、日落黃
假單胞菌屬Sheep SYP (Synaptophysin) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp.
無齒類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Anti-phospho-P53 (Ser9) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSP10/CPN10 熱休克蛋白10 規(guī)格 0.2ml
PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit 人抗浦肯野細(xì)胞/抗Yo 96T
uPA Receptor 英文名稱： 尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 0.1ml
CLASP1 英文名稱： 細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1 0.2ml
Anti-phospho-P53 (Ser9) 磷酸化抑制基因P53Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EGFP 英文名稱： 重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白 0.1ml
CCDC42 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42 0.2ml
Anti-P2Y4R/P2Ry4 P2Y4受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit 人維生素D3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PLGF 胎盤生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HES1 轉(zhuǎn)錄因子HES-1 規(guī)格 0.2ml
Fbg ELISA Kit 大鼠血纖蛋白原 96T
PRRSV 英文名稱： 豬藍(lán)耳病病毒 1ml
Anti-DcR3/TR6 誘捕受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK1 規(guī)格 0.2ml
Human islet amyloid polypeptide,IAPP ELISA Kit 人胰島淀粉樣多肽 96T
Transglutaminase 6 英文名稱： 谷酰胺轉(zhuǎn)胺酶6 0.2ml
CPNE9 英文名稱： 伴侶蛋白9 0.2ml
Anti-DcR3/TR6 誘捕受體3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Amylin ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Collagen III 英文名稱： Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白 0.1ml
Anti-HPV16-E6 人類狀瘤病毒16Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Human fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 人趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CXCL5 上皮中性粒細(xì)胞活化肽78Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MMP-9 基質(zhì)金屬蛋白酶9 規(guī)格 0.1ml
MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A 96T
Phospho-RhoA(Ser188) 英文名稱： 磷酸化RhoA蛋白 0.1ml
