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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4137
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4137 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | Subulura brumpti | LZR4137 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
金頂側(cè)耳Sheep PTPRO (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type O) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
炭疽芽孢桿菌Sheep SPJ (Surfactant Associated Protein J) ELISA Kit拉丁屬名: anthracis
淺灰白鏈霉菌Sheep PROZ (Protein Z) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces griseoloalbus
蠟狀芽孢桿菌Sheep DEFα5 (Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cereus
淡青鏈霉菌Sheep ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces glaucescens
大腸埃希氏菌Sheep TP (Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
青藍(lán)馬杜拉放線菌Sheep S100A7 (S100 Calcium Binding Protein A7) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomadura coerulea
毛霉屬Sheep TPP1 (Tripeptidyl Peptidase I) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
粘質(zhì)沙雷氏菌Sheep TIMP-1 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: marcescens
大腸埃希氏桿菌Sheep PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit 拉丁屬名: Escherichia coli
皺紋單胞菌Sheep HCCS (Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Rugamonas rubra
基利恩帚枝霉Sheep COL14 (Collagen Type XIV) ELISA Kit拉丁屬名: Sarocladium kiliense
釀酒酵母Sheep βTG/PBP/CXCL7/NAP2 (Thromboglobulin, Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces Cerevisiae
Bacillus methylotrophicusSheep HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 用途: 拮抗菌
矩圓黑盤孢Sheep GAL14 (Galectin 14 ) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit進(jìn)口/原裝
大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒英文名稱：Rat lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit 特價(jià)促銷
大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒英文名稱：Rat lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
大鼠淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒英文名稱：Rat lymphocyte factor ELISA Kit進(jìn)口/原裝
GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
MME CD10 / Neprilysin / MME 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh Phospho-Cyclin B1(Ser126) 磷酸化周期素B1 規(guī)格 0.1ml
CCDC51 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白51 0.2ml
Anti-FOXO3A 叉頭蛋白O3AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PI3K 大鼠磷脂酰肌醇激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿菌Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B 規(guī)格 0.2ml
PF-3(Human platelet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3 96T
SIM2 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2 0.2ml
ADCY1 英文名稱： 腺苷酸環(huán)化酶1 0.2ml
Anti-CBFA1/RUNX2/FITC 熒光素標(biāo)記成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-CD4/FITC 熒光素標(biāo)記CD4蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EB2/End binding protein 2 微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2 規(guī)格 0.2ml
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 小鼠CD19分子 96T
MYST1 英文名稱： 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶MOF 0.2ml
COMMD10 英文名稱： 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白10 0.2ml
Anti-PGRN 顆粒蛋白前體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLK3 激肽釋放酶3/舒素3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LAMP2/CD107B 溶酶體相關(guān)膜蛋白2 規(guī)格 0.1ml
ANG- II ELISA Kit 大鼠緊張素Ⅱ 96T
Perilipin A+B 英文名稱： 脂滴包被蛋白A+B 0.2ml
