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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
氣管比翼線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR4141
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-20
  • 更新日期: 2025-02-06
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR4141
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

貨號(hào)

氣管比翼線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

Syngamus trachea

LZR4141


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無(wú)熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下列是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:

根瘤菌屬Sheep ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizobium  sp.

彎孢菌Sheep GP4 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit用途: 研究

紅酵母屬Sheep FOXP1 (Forkhead Box Protein P1) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodotorula  sp.

球孢白僵菌Sheep ECM1 (Extracellular Matrix Protein 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

松杉靈芝Sheep PAR2 (Protease Activated Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Ganoderma tsugae Murrill

腐皮鐮孢Sheep HSP-70/HSPA9 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium solani

灰樹(shù)花(可訂購(gòu))斜面形式Sheep UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit拉丁屬名: Grifola frondosa (Fr.) S.F.Gray

聚生殼菌Sheep CETP (Cholesteryl Ester Transfer Protein) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

孟氏假單胞菌Sheep GzmB (Granzyme B) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

葡萄座腔菌Sheep CC16 (Clara Cell 16KD Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Botryosphaeria dothidea

羅伊氏乳桿菌Sheep PGD2-MOX (Prostaglandin D2-Methoxime) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus  reuteri

粉紅鉚釘菇Sheep AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

黃孢平革菌Sheep TSA (Thyroid Stimulating Antibody) ELISA Kit用途: 紅麻制漿

大腸埃希菌Sheep Alk-Smase (Alkaline Sphingomyelinase) ELISA Kit拉丁屬名: coli

釀酒酵母Sheep FABP5 (Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal ) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae
氣管比翼線(xiàn)蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 ZNF532 英文名稱(chēng): 鋅指蛋白532 0.2ml

DR3 英文名稱(chēng): 死亡受體3 0.1ml

極光激酶B Anti-Aurora B 0.1ml

ENPP6 英文名稱(chēng): 磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6 0.2ml

三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1 Anti-ABCG1 0.1ml

Anti-WWOX /FITC 熒光素標(biāo)記包含氧化還原酶的WW域IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FLT3 (Tyr969) 磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3 規(guī)格 0.1ml

CCDC58 英文名稱(chēng): 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白58 0.2ml

Anti-FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

CTAP III (Human connective tissue-activating peptide III ,CTAP III ) ELISA Kit 人結(jié)締組織活化肽ⅢMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-FOXF1 叉頭蛋白F1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml

UFC(Human urinary free cortisol) ELISA Kit 人尿游離皮質(zhì)醇 96T

SP-A 英文名稱(chēng): 肺表面活性蛋白A 0.1ml

人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Human cytotoxin,CTX ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)

人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Human Cytotoxin-associated protein,CagA ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)

人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4,CTLA-4 ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)

人細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Human intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit特價(jià)促銷(xiāo)

PAR-2 (Protease-activated receptors-2) 蛋白酶激活受體-2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-phospho-ATF2(Thr69/71) 磷酸化活化復(fù)制因子2Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-APE(Ser1417) 磷酸化肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin 規(guī)格 0.1ml

COMP 英文名稱(chēng): 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白 0.1ml

Anti-phospho-ASK1(Thr845) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit 人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Phospho-PKA C (Thr197) 磷酸化蛋白激酶C亞性Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HIP4/CBS 絲氨酸羧甲半胱氨酸合成酶 規(guī)格 0.1ml

Gelsolin ELISA Kit 大鼠凝溶膠蛋白 96T

PP2A beta 英文名稱(chēng): 蛋白質(zhì)磷酸酶2B PP2A β PP2A-β 0.1ml

 


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