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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4143
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4143 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鏈狀帶探針法熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書 | Taenia solium | LZR4143 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
長(zhǎng)枝木霉Sheep FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Trichoderma longibrachiatum
副短短芽孢桿菌Sheep cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacillus parabrevis
栗色渾圓鏈霉菌Sheep Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) ELISA Kit用途: 代謝產(chǎn)物具有弱活性。
茶色銀耳Sheep VIP (Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
靈芝Sheep PLA2R1 (Phospholipase A2 Receptor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Ganoderma lucidium
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素C型Sheep IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit拉丁屬名: perfringens Type C
糞腸球菌Sheep CYP1A2 (Cytochrome P450 1A2) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus faecalis
炭黑曲霉Sheep ApoC1 (Apolipoprotein C1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
釀酒酵母Sheep Sp17 (Sperm Protein 17) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
黑曲霉Sheep γ-ECS (γ-Glutamyl Systeine Synthetase) ELISA Kit用途: 抑菌試驗(yàn)用
三葉草根瘤菌Sheep Surv (Survivin) ELISA Kit用途: 與三葉草共生固氮
深紅酵母Sheep NLR (NOD-Like Receptor9) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodotorula rubra
褐囊蜜環(huán)菌Sheep SA (Sialic Acid) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
秦氏蜜環(huán)菌Sheep M-AChR M2 (Muscarinic Acetylcholine Receptor M2) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
硬水黃桿菌Sheep NT-4 (Neurotrophin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
鏈狀帶探針法熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明書phospho-CSK (Ser364) 英文名稱： 磷酸化酪酸激酶C-SRC 0.1ml
Anti(c-phycocyanin C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
SSTR2 (somatostatin receptor 2) 生長(zhǎng)抑素受體2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-phospho-B-Raf (Ser365) 磷酸化B-RafMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Peptide YY/PYY 酪酪肽 規(guī)格 0.2ml
CD117 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TNK1 英文名稱： 非受體型酪酸蛋白激酶Tnk1 0.1ml
CCDC61 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61 0.2ml
Anti-P14ARF 基因p14Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
PCT(Human Procalcitonin) ELISA Kit 人降鈣素原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-LAIR-1/CD305 白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KY/Kyphoscoliosis peptidase 脊柱側(cè)后凸畸形肽酶 規(guī)格 0.2ml
IFN- Gamma ELISA Kit 大鼠γ干擾素 96T
phospho-PP2A alpha (Tyr307) 英文名稱： 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα) 0.1ml
c-Maf 英文名稱： 原癌基因cMAF 0.1ml
Anti-Phospho-CENP-A (Ser7) 磷酸化著絲粒蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Collagen III 人III型膠原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-c-Jun (Thr93) 磷酸化原癌基因c-JunMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh NTAL B淋巴細(xì)胞鏈接激活蛋白 規(guī)格 0.2ml
T4 Polynucleotide Kinase T4 DNA 激酶 22ul (20次反應(yīng))
TIMP-4 英文名稱： 金屬蛋白酶組織抑制因子-4 0.1ml
Complement C3 英文名稱： 補(bǔ)體C3a過(guò)敏毒素 0.1ml
Anti-NKA 神經(jīng)激肽AMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
CRP(Human C-Reactive Protein) ELISA Kit 人C反應(yīng)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-PAFAH2/Lp-PLA2 脂蛋白磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh HPV16-E7 人類狀瘤病毒16-E7 規(guī)格 0.2ml
LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4 96T
Phospho-PAR4 (Thr163) 英文名稱： 磷酸化蛋白酶活化受體4 0.1ml
