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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4145
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4145 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
塔那痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | Tanapox Virus(TPV) | LZR4145 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
淺被黑蛋巢Sheep SNRPD1 (Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1) ELISA Kit 拉丁屬名: Cyathus griseocarpus
唾液鏈球菌Sheep ST2 (Syntenin 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptococcus salivarius
嘴突凸臍蠕孢Sheep SPC (Pulmonary Surfactant Associated Protein C) ELISA Kit 用途: 研究
中國(guó)擬迷孔菌Sheep GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
總狀共頭霉Sheep PLCγ1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
副氧化微桿菌Sheep CAPF (Cuticular Active Peptide Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Microbacterium paraoxydans
三葉草根瘤菌Sheep TSC22 (Transforming Growth Factor Beta Stimulated Protein Clone 22) ELISA Kit 用途: 與白三葉草共生固氮
雙孢蘑菇Sheep CLDN4 (Claudin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Agaricus bisporus
華根霉Sheep FGβ (Fibrinogen Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus chinensis Saito
海岸微小桿菌Sheep MRP (Multidrug Resistance-Associated Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Exiguobacterium aestuarii
靈芝草Sheep TI-Ag (Thymus Independent Antigen) ELISA Kit用途: 藥用菌
菱形伊薩酵母Sheep RAG-1 (Recombination Activating Gene 1) ELISA Kit拉丁屬名: Issatchenkia scutulata
大腸埃希氏桿菌Sheep ANG III (Angiotensin III) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
豇豆慢生根瘤菌Sheep GSTθ1/GSTt1 (Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit 用途: 與花生共生固氮
布魯氏菌Sheep EAR12 (Eosinophil Associated Ribonuclease A family Member 12) ELISA Kit拉丁屬名: abortus
塔那痘病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 Ube2H 英文名稱： 泛素激活酶2H 0.2ml
DCAKD 英文名稱： 脫磷酸輔酶A結(jié)構(gòu)域蛋白 0.2ml
Anti-Phospho-ULK1 (Ser467) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human gastrin-reliasing peptide,GRP ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)ELISA試劑盒英文名稱：Human pro-gastrin-releasing peptide, ProGRP ELISA Kit進(jìn)口/分裝
人胃泌素細(xì)胞(GCA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human gastrin cell antibody,GCA ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
人胃抑素(GIP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human gastric inhibitory polypeptide，GIP ELISA Kit進(jìn)口/原裝
CCDC63 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63 0.2ml
Anti-P19ARF p19ARF基因Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾臟酪氨酸激酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Nesfatin-1/Nucb2 新的飽食分子蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-32/NK4 白介素32 規(guī)格 0.1ml
pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞核周 96T
PPAP2C 英文名稱： 磷酸脂磷酸水解酶2 0.1ml
TPTE 英文名稱： /抗原44 0.2ml
CSNK1G1 英文名稱： 酪蛋白激酶1γ1 0.2ml
Anti-Caspase-7 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
豬白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Interleukin 12,IL-12/P40 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
豬白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 英文名稱：Porcine Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
豬白介素17(IL-17)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine interleukin 17,IL-17 ELISA Kit特價(jià)供應(yīng)
豬白介素18(IL-18)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit特價(jià)促銷
Complement C3c alpha' chain fragment 1 英文名稱： 補(bǔ)體C3cα 鏈片段1 0.1ml
Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser139) 磷酸化組蛋白H2AXMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
IFA(Human intrinsic factor antibody) ELISA Kit 人抗內(nèi)因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-IL-20R alpha/IL20RA 白介素20受體α鏈Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh L-Selectin/CD62L L選擇素 規(guī)格 0.1ml
GLP-1(human) 人胰素樣肽1 96T
phospho-RAD51(Thr309) 英文名稱： 磷酸化Rad51 0.1ml
