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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號：LZR4149
- 價格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號 | LZR4149 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | Taylorella equigenitalis | LZR4149 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
粟酒裂殖酵母Sheep MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) ELISA Kit拉丁屬名: Schizosaccharomyces pombe
光硬皮馬勃Sheep TAP (Transporter Associated with Antigen Processing) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
路普康湖冷桿菌Sheep CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit拉丁屬名: Cryobacterium roopkundense
指狀青霉Sheep AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium digitatum
Paraconiothyrium hawaiiense Sheep GALR1 (Galanin Receptor 1) ELISA Kit 用途: 植物內(nèi)生真菌
串珠鐮孢Sheep ApoA1 (Apolipoprotein A1) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium moniliforme
白地霉Sheep E2 (Estradiol) ELISA Kit拉丁屬名: Geotrichum candidum
耐久腸球菌Sheep CAPA (Cytotoxin Associated Protein A) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus durans
科恩根霉Sheep PRKAα1 (Protein Kinase, AMP Activated Alpha 1) ELISA Kit 用途: 制葡萄糖用菌，產(chǎn)生葡萄糖苷酶
固氮菌Sheep ProGRP (Pro-Gastrin Releasing Peptide) ELISA Kit拉丁屬名: Azotobacter sp.
枯草芽孢桿菌Sheep PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
釀酒酵母Sheep CYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 用途: 發(fā)酵啤酒易清
人參土成對桿菌Sheep RB1 (Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Dyadobacter sp.
節(jié)桿菌Sheep CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter sp.
枯草芽孢桿菌Sheep ERβ (Estrogen Receptor Beta) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒 ATP7B 英文名稱： 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈 0.1ml
Anti- Alpha-ACTN4/FITC 熒光素標(biāo)記抗α-輔肌動蛋白4IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
PPAR- Alpha(Mouse peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體αMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Cav-1/FITC 熒光素標(biāo)記抗小凹蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh EID1 乙酰基轉(zhuǎn)移酶EID1 規(guī)格 0.2ml
(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽 96T
MESP1 英文名稱： 心發(fā)育中胚層相關(guān)蛋白1 0.2ml
CCDC67 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67 0.2ml
Anti-KLH 血藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLK1 激肽釋放酶1Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh LANPL 富含亮氨酸樣酸性核蛋白 規(guī)格 0.2ml
NKA ELISA Kit(Ret) 大鼠神經(jīng)肽A 96T
P2RX5 英文名稱： 三磷酸腺苷受體P2X5 0.2ml
Human IPO-38 ELISA Kit 人IPO-38蛋白 96T
Transglutaminase 2 英文名稱： 谷酰胺轉(zhuǎn)胺酶2 0.2ml
CLEC2/CLEC1B 英文名稱： C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B 0.2ml
Anti-CYP21 膽固醇21-羥化酶Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠表面(HBsAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit進(jìn)口/分裝
小鼠表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit特價促銷
小鼠核心(HBcAb)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit進(jìn)口/原裝
Complement C3g fragment 英文名稱： 補(bǔ)體C3g片段 0.1ml
Anti-Hemagglutinin (H2N2) 病毒血凝素(H2N2)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Influenza A Virus Hemagglutinin 甲型病毒血凝素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MMAA/cblA 甲基尿癥cblA 規(guī)格 0.2ml
PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人磷酸肌醇3激酶 96T
phospho-RGS19(Ser24) 英文名稱： 磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19 0.1ml
