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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR4163
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-20
- 更新日期： 2025-02-06
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR4163 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
瑟氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | Theileria sergenti | LZR4163 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
惡臭假單胞菌Sheep PLP (Parathyroid Hormone-Like Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas putida
球孢白僵菌Sheep C3 (Complement Component 3) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria bassiana
多欄純潔桿菌Sheep GAD (Glutamic Acid Decarboxylase) ELISA Kit拉丁屬名: Modestobacter sp.
廣食黃桿菌Sheep PDGFD (Platelet Derived Growth Factor D) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium omnivorum
人參布哈加瓦氏菌Sheep TSGF (Tumor Specific Growth Facter/Tumor Supplied Group of Factor) ELISA Kit拉丁屬名: Bhargavaea ginsengi
成團(tuán)泛菌Sheep IGFBP-6 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
球毛殼Sheep SMM (Smooth Muscle Myosin) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium globosum
釀酒酵母Sheep LEP (Leptin) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌Sheep SUMO2 (Small Ubiquitin Related Modifier 2) ELISA Kit用途: 與花生共生固氮
雞傷寒沙門氏菌Sheep L-LDH (L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit拉丁屬名: gallinarum
細(xì)極鏈格孢Sheep FBG (Fibrinogen) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria tenuissima
豇豆慢生根瘤菌Sheep C1q (Complement 1q) ELISA Kit用途: 與綠葉、銀葉山螞蝗共生固氮
雙歧雙歧桿菌Sheep IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit拉丁屬名: Bifidobacterium bifidum
產(chǎn)紫青霉Sheep F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium purpurogenum
保亭油脂酵母Sheep NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lipomyces baotingensis
瑟氏泰勒蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書APOE 英文名稱： 載脂蛋白E 0.1ml
Anti-AVPR2/FITC 熒光素標(biāo)記精氨酸加壓素受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IgG ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白GMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti- Alpha-ACTN4/FITC 熒光素標(biāo)記抗α-輔肌動(dòng)蛋白4IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh FGF22 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子22 規(guī)格 0.2ml
P-Selectin(Human P-Selectin/CD62P/GMP140) ELISA kit 人P選擇素 96T
Met (c Met) 英文名稱： 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體 0.1ml
CCDC90B 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90B 0.2ml
Anti-mu Opioid receptor μ-型受體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
DF-Ab(Human dengue fever antibody) ELISA Kit 人Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-KLH 血藍(lán)蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LAP3 亮氨酸氨基肽酶3 規(guī)格 0.2ml
NKB ELISA Kit(Ret) 大鼠神經(jīng)肽B 96T
P2RX6 英文名稱： 三磷酸腺苷受體P2X6 0.2ml
PLAP 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UBE2U 英文名稱： 泛素蛋白連接酶U 0.2ml
DYDC1 英文名稱： DYDC1蛋白 0.2ml
Anti-ATF4/CREB-2 活化轉(zhuǎn)錄因子4Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EphB1+EphB2+EphB3+EphB4 英文名稱： 酪酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4 0.2ml
酪氨酸激酶B Anti-Trk B 0.1ml
Anti-Transthyretin /FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Contactin 4 + 6 英文名稱： 軸突相關(guān)粘附分子 0.2ml
Anti-Phospho-Stathmin (Ser38) 磷酸化原癌基因蛋白18Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
sP-selectin(Human soluble P-selectin) ELISA Kit 人可溶性P選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Plexin A2 神經(jīng)叢蛋白A2Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Hexokinase 2/HK2 己糖激酶2 規(guī)格 0.2ml
IFN- Alpha(Mouse Interferon Alpha) ELISA Kit 小鼠α干擾素 96T
PPP1R10 英文名稱： 絲酸/蘇酸蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)亞基10 0.2ml
